磷酸川芎嗪微透析体内回收率的研究论文

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1、磷酸川芎嗪微透析体内回收率的研究论文叶勇，周莉玲，晏亦林，黄秋洁【摘要】目的测定磷酸川芎嗪微透析体内回收率并对其稳定性进行考察。方法采用反透析法测定回收率，考察流速、浓度对回收率的影响。结果反透析法测定的体内回收率与媒介中磷酸川芎嗪的浓度无关，稳定性良好。结论微透析取样技术可用于磷酸川芎嗪的药动学研究，体内研究的反透析法可作为微透析研究中磷酸川芎嗪回收率的测定方法。【关键词】磷酸川芎嗪微透析体内回收率Abstract:ObjectiveTodeterminetheinvivorecoveryoftetramethylpyrazine

2、phosphate(TMPP)inmicrodialysisprobesandtostudyitsstability．MethodsTherecoveryofTMPPethod．Theeffectoffloediumbyusingretrodialysismethod．TMPPrecoveryhadgoodstability．ConclusionMicrodialysissamplingcanbeusedforthepharmacokiicstudyofTMPPandretrodialysismethodcanbeusedforth

3、edeterminationofTMPPrecoveryinvivo．Keyethylpyrazinephosphate(TMPP)；Microdialysis；Invivorecovery微透析(Microdialysis，MD)技术是以透析原理作为基础的在体取样技术.freelethylpyrazine，TMP)是中药川芎中的主要活性生物碱，磷酸川芎嗪(Tetramethylpyrazinephosphate，TMPP)为其磷酸盐，临床上广泛用于缺血性脑血管病的治疗。作者拟采用微透析技术研究磷酸川芎嗪在体内的药动学行为，因此有必

4、要测定TMPP体内回收率来评价其体内微透析采样的可行性，本试验采用微透析技术对磷酸川芎嗪在大鼠体内的回收率进行了相关研究，为进一步采用微透析技术探讨磷酸川芎嗪在体内的药动学行为提供实验依据。1仪器与试药高效液相色谱仪:DionexSummitP680(DIONEX公司)，微透析设备(Sm，活性透析膜长度4mm，分子量截留值为20kD；CMA/20MicrodialysisProbe：膜直径0.5mm,活性透析膜长度为10mm,分子量截留值为20kD;灌注器推进泵(CMA402SyringePump),灌注器(CMA1.0mlExmi

5、reMicrosyringe，MS-GAN100)。磷酸川芎嗪对照品购于中国药品生物制品检定所(批号：100845-200501)。SD大鼠（广州中医药大学实验动物中心，许可证号SCXK粤2006-003）。色谱甲醇(DIMA公司)，水为纯水，其他试剂为分析纯。2方法2.1色谱条件色谱柱为PhenomenexLunaC18(4.6mm×250mm,5μm);流动相为甲醇水（3∶2,V/V）;流速为1.0ml·min-1;检测波长：295nm;柱温室温；进样量20μl。2.2空白林格氏液的配制分别称取氯化钠8.5907g，无水氯化钙

6、0.2553g和氯化钾0.2982g溶解于蒸馏水中，定容至1000ml,用0.22μm的水系微孔滤膜过滤,超声20min脱气，即得林格氏液(Ringer's液)。2.3标准曲线的制备精密称取五氧化二磷干燥器中干燥至恒重的TMPP标准品3.93mg置于100ml量瓶中，Ringer's溶液定容，振摇即得浓度为39.3μg·ml-1的标准品贮备液。对标准品贮备液进行倍比稀释得质量浓度分别为0.131，0.393，0.786，1.179，1.572μg·ml-1标准品液，均进样20μl,以标准品浓度(X)对峰面积（Y）进行线性回归，得回归

7、方程Y=0.257X-0.0031，r=0.9998,TMPP在0.131～1.572μg·ml-1范围内呈良好的线性关系，在该色谱条件下的最低检测限为5ng·ml-1。2.4精密度考察取0.393，0.786和1.179μg·ml-1的3种浓度标准品溶液分别在1d内连续进样5次，进样20μl/次，另分别在连续5d内每天进样1次，进样20μl/次，考察日内精密度和日间精密度，结果表明标准品液的日内精密度RSD分别为0.93%,0.73%和0.68%，日间精密度RSD分别为1.58%,1.25%和1.08%，表明精密度良好。2.5体内

8、微透析试验2.5.1TMPP林格氏液的配制分别精密称取TMPP适量，加林格氏液溶解定容，微孔滤膜过滤，得TMPP浓度分别为0.142，0.710，1.42μg·ml-1的林格氏液。2.5.2探针的植入雄性SD大鼠约300g左右，腹腔注