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时间:2018-07-08
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1、氯离子通道阻断剂对豚鼠离体气管条收缩的影响论文.freeline;calciumanonAbstract:AIMTostudytheeffectsandmechanismsofchloridechannelblockers(NFAandNPPB)onthecontrac-tionofisolatedtrachealstripsofguineapigs.METHODSTheincubatedisolatedtrachealstripsofguineapigsil(Ver)ined.RESULTSThecontractionsinducedbyKClor5-
2、HTinisolatedtrachealstripsofguineaPigarkedlyin-hibitedbyNFAandNPPB.Thedepressedpercentageidiatebetarkedlyinhibitedthecontrac-tionsinducedbyCa2+releasedfromanintracellularstoreandextracellularCa2+.CONCLUSIONNFAandNPPBcansig-nificantlyinhibitcontractionoftrachealstripsinducedbyKCla
3、nd5-HTandtheirmechanismmaybethatblockingchloridechannelcanaffecttransportationofCa2+.0引言氯离子通道阻断剂5-硝基-2-3苯酚丙胺苯甲酸盐[5-nitro-2(3-phenylpropylamino)benzoate,NPPB]、氮氟灭酸(niflumicacid,NFA)属于单羧酸衍生物,近年的动物实验研究发现,NPPB,NFA等可抑制血管平滑肌的收缩反应[1].但NPPB,NFA对气管平滑肌的作用未见报道,我们观察了NPPB,NFA对豚鼠离体气管平滑肌收缩反应的影响
4、,并与维拉帕米(verapamil,Ver)进行比较,探讨其作用机制.1材料和方法1.1材料NPPB,NFA购自Sigma公司,5-羟色胺(5-HT)由第四军医大学药理学教研室招明高博士惠赠,用双蒸水配成溶液备用.实验灌流用克氏液(Kreb’s)含(mmolL-1):NaCl118.3,KCl4.7,CaCl22.5,NaHCO325.0,KH2PO41.2,MgSO41.2,葡萄糖11.1,用双蒸水配制,以HCl或NaOH调节至pH7.4.实验动物用豚鼠(第四军医大学实验动物中心提供)14只,体质量350~500g,雌雄不拘.1.2方法1.2.1标本制
5、备参照文献[2-4]报道的方法,豚鼠用铁锤击头处死,取出气管,置于玻璃皿中,在通O2的Kreb’s液中,分离周围结缔组织,用一细玻棒穿入气管,将气管剪成约4mm×20mm的螺旋条,一端固定在玻璃钩上,另一端固定在张力传感器上,把气管条置于盛有8mLKreb’s液浴槽中,通以950mLL-1O2+50mLL-1CO2的混合气体,温度保持在(37±0.5)℃,静止张力维持1g,每30min换液1次,平衡2h后开始给药.气管条收缩张力通过张力传感器记录于多道生理记录仪上.1.2.2NFA和NPPB对气管条收缩的作用气管条在浴管中平衡2h后,在浴液中加入KCl或
6、5-HT,使其终浓度分别为40mmolL-1或1×10-4mmolL-1[5]致气管条收缩,当气管平滑肌张力升到高点时,用药组标本加入NFA(终浓度50μmolL-1)或NPPB(终浓度50μmolL-1),对照组加入同体积生理盐水,观察比较各组标本给药后3min曲线下降幅度,并按下式求得解痉百分比:解痉百分比=(给药前曲线高度-给药后曲线高度)÷给药前曲线高度×100%.1.2.3氯离子通道阻断剂和维拉帕米对气管条两种收缩组分的作用气管条在浴液中平衡稳定后,用无Ca2+(不加CaCl2,加50μmolL-1的EDTA)的Kreb’s液反复冲洗标本,稳定
7、30min后,在无Ca2+浴液中加入100nmolL-1的5-HT,待气管条产生依赖于细胞内Ca2+钙池释放性收缩达峰值后,立即加入2.5mmolL-1CaCl2,气管收缩张力再次升高,此系5-HT引起的细胞外Ca2+内流所致的依赖外Ca2+性收缩,以两次收缩累积上升的张力之和为100%(即Emax).用Kreb’s液反复冲洗6次后,气管条舒张,回到基线,待基线稳定后,在无Ca2+液中加入NFA或NPPB使终浓度达50μmolL-1,10min后再加入100nmolL-15-HT,重复测定无Ca2+和加Ca2+后气管条收缩峰值(即E),比较加药前后两种收
8、缩占Emax的百分率(即E/Emax%),计算收缩抑制率:[1-(加药后的E/E
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