黄芩苷元对小鼠四氯化碳肝损伤的保护作用论文

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1、黄芩苷元对小鼠四氯化碳肝损伤的保护作用论文刘建新，谢水祥，周俐，汪秀荣，杨庆春，张文平【摘要】目的探讨黄芩苷元对小鼠CCl4肝损伤的保护作用。方法采用CCl4小鼠急性肝损伤模型，测定血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）活性、肝组织MDA含量，并观察肝组织病理变化。结果黄芩苷元能保护CCl4所致小鼠肝损伤.freelice.MethodsTheexperimentalmodelofliverinjuryice.Theserumalanineaminotransferase(ALT),aspartateaminot

2、ransferase(AST)andlivermalondialdehyde(MDA)ined.Thepathologicalexaminationoflivered.ResultsBaicaleinsignificantlyreducedserumALT,ASTactivitiesandliverMDAcontent,andtheliverlobuleelioratedobviously.ConclusionBaicaleinhasaprotectiveeffectonacutehepaticinjuryinduced

3、byCCl4.Keyl/kg；BaiⅠ组小鼠腹腔注射Bai50mg/kg；BaiⅡ组小鼠腹腔注射Bai100mg/kg。1次/d，连续15d。末次给药后2h，正常组腹腔注射容量花生油，其余各组均腹腔注射0.1%CCl4花生油溶液10ml/kg一次。禁食，自由饮水，16h后各组小鼠断头取血。以16000r/min离心5min，取血清，采用400型全自动生化分析仪测定ALT，AST活性；采用分光光度法测定MDA，MDA含量测定采用硫代巴比妥酸法。取适量肝组织用冰冷生理盐水冲洗，置冰浴中匀化制得10%肝匀浆，以4000r/mi

4、n离心10min，取上清液测定MDA，蛋白定量采用考马斯亮兰法,以牛血清白蛋白为标准,具体步骤均按各试剂盒说明书操作。另取各鼠相同部位的肝脏用10%福尔马林溶液固定，采用常规石蜡切片，HE染色，光镜下观察肝细胞变性坏死程度。统计方法使用SPSS11.0统计软件包，所有数据用±s表示，计量资料采用方差分析的PostHoc检验，P＜0.05为差异有显著性。3结果3.1Bai对CCl4肝损伤小鼠ALT，AST活性的影响如表1所示，Bai高、低剂量组可显著性抑制CCl4所致的ALT，AST的升高，低剂量组虽没有显著性抑制CCl4

5、所致的ALT，AST的升高，但均有抑制CCl4所致肝损伤的趋势。3.2Bai对CCl4肝损伤小鼠肝脏MDA含量的影响如表2所示，Bai高、低剂量组可明显降低CCl4肝损伤小鼠肝脏MDA含量，且呈剂量相关性。见表2。表1Bai对CCl4所致肝损伤小鼠血清ALT，AST活性的影响(略)表2Bai对CCl4肝损伤小鼠肝脏MDA含量的影响(略)3.3Bai对CCl4肝损伤小鼠肝组织病理学的影响CCl4肝损伤造模组肝组织明显损伤，肝细胞浊肿、气球样变性，病变以肝小叶中央静脉周围为重。肝小叶内可见轻度、中度肝细胞点状、碎片状坏死；坏

6、死区内有中、重度淋巴细胞和浆细胞浸润，汇管区内有单核细胞浸润。在各给药组中，Bai低、高剂量组也有不同程度的肝细胞破坏、炎性细胞浸润等肝损伤病变，但与模型组比较损伤程度明显减轻，尤其是高剂量组表现更为明显。4讨论肝脏是外源性过氧化物在体内转化与排泄的主要场所，肝内经氧化还原后产生多种自由基，后者可引起组织过氧化损伤。近年来，对有毒基团在肝损伤中的作用十分重视，据文献报道，有毒氧基在肝细胞损伤过程中发挥着重要作用［6］。CCl4可引起化学性肝脏损伤，用CCl4诱导小鼠肝损伤，其致毒机制［7］是CCl4经肝微粒体细胞色素P4

7、50代谢生成自由基（CCl3-），攻击肝细胞膜上磷脂分子引起脂质过氧化，或与肝微粒体脂质和蛋白质发生共价结合，破坏肝细胞膜结构和功能的完整。ALT为可溶性酶主要分布在细胞浆内，而AST有80%分布在线粒体内，其余分布在细胞浆内。当肝细胞破坏、细胞通透性增高及线粒体损伤时，ALT，AST活性增高，并且ALT、AST活性的高低变化与肝细胞受损的程度相一致。有研究表明在轻型中毒性急性肝损伤时，血清酶活性ALT升高最为明显，在重型肝损伤时，肝细胞受到严重损伤，血清中AST升高的程度可超过ALT。因此，血清中的ALT，AST是用于

8、诊断肝实质损害的主要酶类。本实验经CCl4处理后小鼠血清ALT、AST均显著升高，表明此时小鼠肝细胞已经损伤，模型复制成功。本研究证明用Bai治疗的小鼠血清ALT、AST较模型组显著性降低，且呈剂量相关性，同时能明显改善肝脏组织结构的病理损害，提示Bai对化学性肝损害具有一定的保护作用。肝脏脂质过氧化的程度可通过测定