中药夏枯草对甲状腺癌细胞nis基因表达及摄碘率的影响论文

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1、中药夏枯草对甲状腺癌细胞NIS基因表达及摄碘率的影响论文张王峰,付强,赵华栋,徐海峰，周润锁,袁梦晖,周飞华,南菁【摘要】目的：探讨中药夏枯草对甲状腺癌细胞株K1钠/碘同向转运体(NIS)基因表达及摄碘率的影响，为夏枯草辅助放射性碘治疗甲状腺癌提供依据.方法：分别以不同浓度(0,20,50,100,150,200g/L)的夏枯草处理体外培养的甲状腺癌细胞株(K1)，48h后利用半定量RTPCR检测细胞NISmRNA表达，γ计数仪检测细胞摄碘能力.结果：夏枯草浓度在0～100g/L范围内，细胞NIS基因表达及摄碘能力随夏枯草浓度

2、的增加而增加(P0.05).当夏枯草浓度达150～200g/L时，增加后浓度与100g/L浓度相比差别无统计学意义(P0.05).结论：夏枯草可上调甲状腺癌K1细胞NIS基因表达，增强其摄碘率.freeledicinePrunellavulgarisontheexpressionofsodiumiodidesymporter(NIS)geneandradioiodideuptakeinthyroidcancercellline(K1),soastoevaluatethesignificanceoftraditionalChines

3、emedicinePrunellavulgarisinthetreatmentofthyroidcanceredicinePrunellavulgarisatconcentrationsof0,.freelRNAofK1inedbyRTPCRanditsradioiodideconcentrationactivityeasuredbyγcounter.RESULTS：TraditionalChinesemedicinePrunellavulgarisattheconcentrationbetedicinePrunellavul

4、gariscouldincreasetheexpressionofNISgeneandtheactivityofradioiodideconcentrationofthyroidcancercellline(K1)inadosedependentmanner．TraditionalChinesemedicinePrunellavulgarismayplayaroleinthetherapyofthyroidcancer.【Keystumorcells；RTPCR；NIS；radioiodideuptake0引言中药夏枯草治疗甲

5、状腺肿瘤有悠久历史，目前多种专利报道的抗癌中成药的主要成分也是夏枯草［1-3］.临床治疗中，甲状腺癌对化疗药物不敏感，而放射性碘治疗分化型甲状腺癌疗效确切.如何提高甲状腺癌细胞的摄碘率是目前研究的热点.钠/碘同向转运体(Sodium/IodideSymporter，NIS)基因被认为与甲状腺细胞对碘的摄取有密切关系.本研究以人甲状腺癌细胞系K1为研究对象，观察了夏枯草对甲状腺肿瘤细胞钠/碘同向转运体NIS基因表达及摄碘率的影响，从而探讨夏枯草能否增加甲状腺癌对碘的摄取以起到增加放射性碘对甲状腺癌的疗效.1材料和方法1．1材料NU

6、2500型CO2培养箱（美国HUAIRE公司）；GU20低温高速冷冻离心机（江苏太仓医疗仪器厂）；SEM培养基（美国Gibco公司）；小牛血清（杭州四季青生物材料工程有限公司）；Trizol（Gibco公司）；反转录试剂盒（Promega公司）；PCR酶为rTaKaRa(宝泰克公司)；PCR反应引物（北京奥科生物技术公司）.NIS上游引物序列为5′tggttaagggaccggaagacatc3′，下游引物序列为5′agttgcctactgcaatctacaagg3′，产物片段为342bp.GAPDH（3磷酸甘油醛脱氢

7、酶），上游引物序列为5′AGGTCCACCACTGACACGTT3′，下游引物序列为5′GCCTCAAGATCATCAGCAAT3′，产物片段为310bp.夏枯草配制：40g夏枯草加水400mL，煮沸30min并过滤除渣，熬制浓缩液定容至40mL，滤液浓缩浓度为1g/mL，经120℃30min高压灭菌后，用直径为22μm的微孔滤膜正压过滤，使用时用DMEM培养液稀释至所需的不同浓度梯度.1.2方法1.2.1细胞培养取对数生长期的细胞以1×108个/L密度接种于培养瓶中，24h后悬浮细胞贴壁，然后换以新的培养液加入不同浓度夏

8、枯草（0，20，50，100，150，200g/L）.作用48h后收集细胞进行相应指标的检测.1．2.2RTPCR检测NISmRNA的表达取1×108个/L细胞，加1mLTrizol裂解液于培养瓶中，用细胞刮勺将细胞充分刮下，转入1.5mL离心管