栀子双波长融合高效液相色谱数字化指纹图谱研究论文

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1、栀子双波长融合高效液相色谱数字化指纹图谱研究论文【摘要】目的采用双波长融合法建立栀子254nm和326nm波长下的融合HPLC指纹图谱。方法采用反相高效液相色谱法，使用CenturySILC18BDS柱(20cm×4.6mm，5μm)，以1%醋酸水-1%醋酸乙腈为流动相，低压线性梯度洗脱，柱温（30.0±0.15）℃，采用DAD检测器同时采集2个特征吸收波长下的信号，测定10批不同产地栀子HPLC指纹图谱。结果用“中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统”软件建立了栀子254nm和326nm的双波长融合HPLC指纹图谱.freelethod.MethodsThec

2、hromatographicfingerprintsplesolutioneachtimeonaCenturySILC18BDScolumn(20cm×4.6mm，5μm)posedof1%acetateacid-l/min,thecolumntemperatureaintainedat(30.00±0.15)℃andtheDADdetectorethod,acquired41monpeaksbytakingthepeakofgeniposideasreferentialpeak.ThefingerprintsoftheTraditionalChineseMedi

3、cinefingerprintationcharacteristics"andtheresults.ConclusionThedual-ethodcaneffectivelycontrolthequalityofFructusGardeniaeandoveretheloationofmono-ethodforthoroughlyandauthenticallyrevealingthecharacteristicsofTCM.Keyethod;Highperformanceliquidchromatography;Fingerprints;Super-informa

4、tioncharacteristic栀子为茜草科植物栀子GardeniajasminoidesEllis的干燥成熟果实，其味苦、寒，归心、肺、三焦经，具有泻火除烦、清热利尿、凉血解毒之功效。其主要化学成分有环烯醚萜苷类(如栀子苷)、有机酸类(如绿原酸)、色素(如藏红花素)，此外还有挥发性成分及多糖等［1］。文献中有对栀子进行指纹图谱研究的报道［2～4］，但由于栀子中环烯醚萜苷类、有机酸酯类、西红花苷类等成分的最大吸收波长不一致，建立单一波长下的HPLC指纹图谱难以对栀子进行整体表达和全面评价。曾有人应用融合方法对指纹图谱进行研究，但未能全面反映其信息［5～6］。本

5、文运用二极管阵列检测器采集了2个特征吸收波长下的指纹图谱，用“中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统”软件［7］建立了栀子水提取液254nm和326nm的双波长融合HPLC指纹图谱，并对其进行了全面评价，将其与265nm波长下指纹图谱进行对比，证明双波长融合指纹图谱优于单波长指纹图谱，符合建立中药指纹图谱的信息最大化原则。1仪器和试药Agilent1100型液相色谱仪（配有二极管阵列检测器、低压四元梯度泵、在线脱气装置、自动进样器），ChemStation工作站（Agilent科技有限公司）。KQ-50B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），旋转蒸发仪RE5

6、2（上海亚荣生化仪器厂），Sarturius-BS110S分析天平（北京赛多利斯天平有限公司）。绿原酸、栀子苷（中国药品生物制品检定所），乙腈（色谱纯，山东禹王实业有限公司），冰醋酸（色谱纯，天津市科密欧化学试剂开发中心），其它试剂均为分析纯，所用水为去离子水。10批栀子药材产自河南唐河县S1，贵州铜仁S2，安徽池州东至县S3，河南桐柏县S4，云南威信县S5，云南省红河哈尼族彝族自治州S6，浙江五凤乡S7，四川达县S8，江西金溪县S9，广西鹿寨县S10，经沈阳药科大学孙启时教授鉴定均为茜草科植物栀子GardeniajasminoidesEllis的干燥成熟果实。2

7、方法与结果2.1样品供试液制备栀子于60℃干燥40min，粉碎后取约2.5g，精密称定，加水50ml，回流提取2h，滤过，残渣加水30ml，继续回流2h，合并两次滤液，减压浓缩至20ml，加乙醇至80%(V/V)，冷处避光放置、醇沉24h，滤除沉淀，减压回收乙醇至无醇味，残液再用水定容至25ml，摇匀，作供试液。2.2对照品溶液制备精密称取栀子苷对照品5.0mg，置25ml量瓶中，以甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，得浓度为200μg·ml-1栀子苷对照品溶液。同法配制400μg·ml-1绿原酸对照品溶液。2.3色谱条件CenturySILC18BDS柱(20cm×4.

8、6mm，5