诱导骨髓间充质干细胞再生汗腺组织的神经与血管支配研究

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1、诱导骨髓间充质干细胞再生汗腺组织的神经与血管支配研究：付小兵，孙同柱，雷永红，包晓霞，张翠萍，盛志勇【摘要】目的研究诱导骨髓间充质干细胞再生汗腺组织后的神经与血管分布特征，以确认再生汗腺组织是否受到新生神经的支配和新生血管的血液供应，进而评价再生汗腺组织的质量。方法选择烧伤后行瘢痕切除术患者4例。每例患者均设创面自体骨髓间充质干细胞(MSCs)移植和对照两个部位。移植部位在瘢痕切除的创面上接种经过诱导的MSCs,而对照部位除未接种MSCs外，其余方法同治疗创面。术后3个月在移植部位和对照部位分别进行发汗试

2、验。在移植部位发汗试验呈阳性处取材，同时取对照部位的组织和术中切下的瘢痕组织。采用免疫组织化学二步法检测所取组织标本的S100蛋白(S100)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、八因子相关抗原(ⅧRAg)和CD34的表达，并与正常皮肤作比较研究。结果4例创面移植部位发汗试验均呈阳性,对照部位发汗试验阴性。免疫组织化学检测显示移植部位的真皮浅层有结构类似于正常汗腺的组织团块，而对照部位未观察到类似结构。S100、NSE、ⅧRAg和CD34在移植部位、对照部位、瘢痕组织以及正常皮肤均有表达，并且S1

3、00、NSE、ⅧRAg和CD34在移植部位再生汗腺组织中的分布与在正常皮肤汗腺组织中的分布极其相似。结论诱导骨髓间充质干细胞再生汗腺的组织中均有神经与血管分布，提示形成具有功能的汗腺组织可能受到新生神经的支配和新生血管的血液供应，骨髓间充质干细胞经诱导可以生成形态和功能较好的汗腺组织。【关键词】汗腺;干细胞;S100蛋白;神经元;烯醇化酶;抗原Distributionofnerveandbloodvesselsinregenerativesbonemarroesenchymalstemcells(MS

4、Cs)andconfirminatedbytheneplantedintoscarcutpart.Thentheyis.Theeprocedures,butplantation.Perspirationtestadeafter3monthsandthebiopsythetransplantedareasandcontrolareas.Theimmunohistochemistryalskinandscartissueinedandusedascontrol.ResultsTheperspirationt

5、estonthetransplantedareamunohistochemicalexaminationconfirmedthatthepositiveexpressionofS100,NSE,ⅧRAgandCD34couldbefoundintissuestakenfromthetransplantedarea,controlparts,normalskinandscartissues.Furthermore,thedistributionsofS100,NSE,ⅧRAgandCD34onthe

6、transplantedareasilartothoseonthenormalskin.ConclusionTheregenerativestheinducedMSCchavethedistributionofthenerveandbloodvesselsandthesefunctionalsaybedominatedbythenecells;S100;neuron;enolase;antigen　　我们前期的工作证明，将汗腺细胞与骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)进

7、行共培养，在体外可以成功诱导MSCs向汗腺细胞表型分化。在此基础上，将具有汗腺细胞表型的MSCs自体移植于患者切除瘢痕创面上,可以再生出汗腺样结构并且具有类似于正常皮肤的发汗功能[1]。在再生汗腺部位取组织活检，行组织学与免疫组织化学检查，结果显示在移植经过诱导的MSCs创面愈合部位真皮浅层有大量汗腺细胞表面标志物，即癌胚抗原(CEA)染色阳性细胞,在某些区域这些阳性细胞分布较为集中,形态与汗腺组织相似,而对照创面愈合组织与术前切除的瘢痕组织中均未见CEA阳性染色细胞。在此基础上，又进一步研究了再生汗腺组

8、织中S100蛋白(S100)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、八因子相关抗原(ⅧRAg)和CD34的表达，以探讨再生汗腺组织是否受到新生神经的支配和新生血管的血液供应，进一步评价再生汗腺组织的质量。材料与方法　　1一般资料　　选择移植经诱导MSCs再生汗腺术后3个月患者4例(男性1例，女性3例)，年龄12～21岁。移植部位分别为上臂、胸部、手部和颈部。每例移植患者创面分为移植和对照两个部位。移植部位在切除瘢痕的创面上接种