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时间:2018-07-07
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1、哈蟆油质量控制方法论文【摘要】根据历史文献和现代哈蟆油研究的成果,进行整理、分析、总结,阐述了哈蟆油质量控制现状和方法,从传统的基源鉴别发展到性状鉴别、显微鉴别、色谱法、光谱法以及生物鉴定法,尤其是现代发展较好的气相色谱、高效液相色谱、电泳色谱、PCR技术以及指纹图谱技术的应用使哈蟆油的研究进入了一个更高的科学领域。对哈蟆油的鉴定手段不断的完善,为提高哈蟆油质量控制和鉴别真伪提供了依据。【关键词】中药;哈蟆油;质量控制方法药材的真伪鉴别和品质评价是临床应用、成药制备、中药科研不可缺少的前提条件。我国药材品种繁多,据统计约有一万二千多种,由于地大物博.freelporariach
2、ensinensisDavid雌蛙的输卵管,经采制干燥而得。据《中国药典》(2005年版)Ⅰ部收载,具有补肾益精,润肺养阴的功效,用于阴虚体弱,神疲乏力,心悸失眠,盗汗不止,痨嗽咳血[1]等症状。随着中药现代化技术的发展,哈蟆油的质量控制技术也在不断的提高。1基源鉴定法基源鉴定法就是应用植物、动物或矿物形态和分类学等方面的知识,对中药的来源进行鉴定。中国林蛙的形态特征[2]为:体长5~7cm;头长等于或大于宽,口内锄骨齿位于肉鼻孔后方,排列成两短行;两侧耳无后腺;背面黄褐色,较平滑;腹面黄白色,胸骨平坦,下肢部两侧稍膨大;后肢长为躯体的1.5倍。几种蛙类的检索:1.膝不互交……
3、……………………………………………………21.两膝互交…………………………………………………………32.大腿后面不具白色纵纹…………………………………青蛙2.大腿后面具有一条明显的白色环纹…………………金钱蛙3.体平扁而稍小;胫跗关节不达眼部,雄性无声囊……………………………………………………………黑龙江林蛙3.体略扁而稍大;胫跗关节前达眼部,雄性有声囊………………………………………………………………中国林蛙2性状鉴别法哈蟆油呈不规则的块状,弯曲而重叠,长1.5~2cm,厚1.5~5mm,表面黄白色,呈脂肪样光泽,偶有带灰白色薄膜状干皮。摸之有滑腻感,在温水中浸泡体积可膨胀10
4、~15倍[3]。气腥,味微甘,嚼之有黏滑感[1]。3显微鉴别法董万超等[4]报道了林蛙油的显微特征如下:加碘酊染色后,在显微镜下观察,呈金黄色。腺体细胞肥大,呈长椭圆形,排列整齐,细胞壁明显,靠腺体内腔一端较窄,细胞壁凸起,细胞核椭圆形,位于细胞中间稍偏向腺体内腔一面,腺体底部较宽,上端较狭,呈圆锥形。腺体内开口呈心脏形,内凹,整个腺体布满细小纹理。为鉴别哈蟆油与中华大蟾蜍输卵管、明太鱼精巢、琼脂蛋白加工品、马铃薯甘薯的伪制品提供了依据。4理化鉴别法4.1荧光检查刘秀峰等[5]报道了哈蟆油干品在365nm下呈黄色的荧光;乙醇浸出物在254nm下呈蓝白色荧光[4]。4.2化学定性
5、分析据报道[4]蛤蟆油水浸液双缩脲反应为深紫红色;加茚三酮试剂,反应为深蓝紫色。为鉴别真伪提供了依据。4.3化学定量分析1991年,刘永镇等[6]利用哈蟆油与Fehling试剂生成沉淀的反应,定量的鉴别了哈蟆油与其伪品蟾蜍输卵管。钱笈缔等[7]采用蛋白质自动分析仪测定冰糖哈蟆油中蛋白质的含量,探索了动物药制剂的指控方法。王秋雨等[8]采用半微量的凯氏定氮法测定了哈蟆油和青蛙油中蛋白质的含量分别为72.8%和73.8%。4.4光谱分析法4.4.1可见分光光度法卫功庆等[9]用美国产DU650分光光度计,在553nm下测定了哈蟆油和青蛙油中胆固醇的含量,分别为2.12,4.92mg
6、/kg,由此确定哈蟆油比较适合中老年人服用。4.4.2紫外光谱法李明刚等[10]在0~360nm下对哈蟆油和中华大蟾蜍输卵管95%乙醇浸出物进行了紫外检测,结果哈蟆油9个吸收峰分别位于4,114,129,252,256,275,311,312,314nm;中华大蟾蜍输卵管8个吸收峰分别位于4,113,131,216,245,275,298,315nm;王丽兰等[11]紫外光谱法测定了哈蟆油中总核酸的含量为2.69%,DNA为(0.13±0.01)%,RNA为(2.56±0.05)%。2006年,作者报道了采用紫外谱线组法,对不同产地和不同溶剂提取的哈蟆油正品和伪品的紫外及其一阶
7、导数光谱进行了检测,为哈蟆油的质量控制和真伪鉴别提供了依据[12,13]。4.4.3红外光谱法对哈蟆油的红外光谱的报道较少,丘泽雨等[14]对不同产地的珍珠、蟾蜍、哈蟆油、冬虫夏草、五灵脂的同种药材进行了对比研究,并用红外光谱法进行了药材真伪优劣鉴别。4.4.4原子吸收光谱法和发射光谱法王秋雨等[8]用原子分光光度计(VARIANAa220)和等离子发射光谱仪(日立Z-8200)测定了哈蟆油与青蛙油中微量元素和重金属的含量,结果哈蟆油与青蛙油均含有人体必需的常用微量元素,但青蛙油中重金属Pb
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