黑龙江奶牛站大肠杆菌抗药化和抗药基因检验概述

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1、黑龙江奶牛站大肠杆菌抗药化和抗药基因检验概述第一章文献综述1.1前言大肠杆菌是大肠埃希氏菌（Escherichiacoli）的俗称，属于大肠杆菌科（Entero-bacteriaceae）、埃希氏菌属（Escherichia）的成员，是一类重要的人畜共患病传染源。Escherich首次从婴儿腹泻物中分离出大肠杆菌后，才开始认识到其致病性。医学和兽医临床上大肠杆菌也是常见的条件性病原菌之一，是人和其他动物肠道内占优势的菌群[1]。对奶牛养殖场奶牛肠道和环境中大肠杆菌的耐药现状了解和探讨，可以分析养殖场用抗菌药物治疗疾病和日常添加对大肠杆菌选择压力与细菌耐药性产生的关

2、系。分析牛群肠道细菌和环境分离株耐药基因的检出情况，判断耐药细菌在牛群和环境之间转移的可能性。通过对养殖动物和养殖环境的细菌耐药现状和耐药基因调查，对养殖过程中的抗菌药物的使用情况统计分析，可以在一定程度上了解及掌握动物源细菌耐药性产生和扩散程度，可以掌握环境细菌在环境和动物共同的压力下的耐药性产生情况，可以对奶牛场兽医临床抗菌药物选择和合理使用提供一定的参考。同时对乳制品原料安全提供一定的保障。奶牛场细菌各种耐药基因分子流行病学的研究，有利于进一步揭示细菌耐药性的流行扩散机制。自从青霉素的发现及临床应用，陆续诞生了多种抗生素和化学合成类抗菌药物，化学合成抗菌药物

3、的出现开创了化学治疗感染性疾病的新纪元。降低了临床并发症发生率和病死率，降低了畜禽养殖风险，保证了动物的健康，保障了畜产品价格稳定。自从人类发现磺胺及链霉素添加于饲料有促生长作用以来，1949年美国和英国相继开始批准一些抗菌药物用作饲料添加剂使用。我国最早是在二十世纪70年代开始使用抗菌促生长剂。抗菌药物在动物养殖过程中的使用对于预防动物疾病、减少动物死亡、促动物生长、提高经济收益等方面起到重要作用。在我国畜牧业发展的不规范时期，抗菌促生长剂对我国畜牧业的发展起到的作用功不可没。可是，随着人类关注人医抗生素等抗菌药物的滥用，兽医临床治疗和养殖业也用抗菌促生长剂的大

4、量应用问题也逐步引起了社会的关注。因为一些病原细菌对常用的抗菌药产生耐药性的同时共生菌也出现了抗药性。两者越来越快的耐药性产生速度给动物养殖业增加了风险，给公共卫生的疾病防控带来了前所未有的挑战。对于动物体内的共生菌和环境中的常在菌耐药性、耐药水平、耐药基因的检测，可以良好的反应出畜群抗菌药物的耐药性变化趋势，为养殖过程中提早预防重大耐药细菌性疾病提供参考。细菌的耐药机制多种多样，人类所掌握的细菌耐药机制还不是十分完善。耐药现象的出现可能源自细菌在选择压力下产生自身结构变化、自身基因功能改变，也可能源于耐药质粒在细菌间的传递等机制。尽管如此，就现有的兽医临床常用药

5、分析细菌的耐药性，用常规PCR分析常见耐药机制相关基因还不失是一个检测环境和动物群体耐药性的良好方法。1.2牛源大肠杆菌的致病性大肠杆菌可以危害哺乳期初生犊牛，也可以危害成年牛。犊牛大肠杆菌病主要是通过消化道感染，称为犊牛白痢，尤以7日龄内未哺初乳的犊牛多发，病死率很高，多呈现地方性流行。犊牛在发生大肠杆菌性腹泻时发病率和死亡率都较高的，而且还能同时引起一些其他疾病，对养牛场造成巨大损失，危害程度很大。对于成年牛的危害主要表现在奶牛乳房炎和一些产毒素大肠杆菌引起的败血症等。大肠杆菌极易产生耐药性，既可通过耐药质粒进行传播产生，也可通过环境的抗生素选择压力产生，使得

6、临床上不断出现新的耐药菌株，并且耐药谱系不断扩大。同时畜禽胴体内及相应的产品内残留的抗菌药物和耐药菌株可以在不同动物间的传播，也可以通过食物链进入人体。这些都给我国畜牧业可持续发展的目标和人类的公共卫生安全都带来一定的潜在危害。1.2.1大肠杆菌病原特性大肠杆菌（Escherichiacoli）是革兰氏阴性杆菌，在显微镜下观察此菌单一或成对出现，没有芽孢，两端为钝圆形，较直。大多数菌株有鞭毛，能运动，有的菌株有荚膜。本菌是兼性厌氧菌，最适生长温度为37℃，最适生长pH为7.2-7.4。本菌在普通琼脂上可形成灰白色菌落，此菌落为圆形，稍隆起，边缘湿润的菌落。在血平板

7、上致病性大肠杆菌可发生溶血现象，在麦康凯培养基上和SS培养基上大肠杆菌生长为红色菌落，SS培养基是沙门氏菌和志贺氏菌的鉴别培养基，大肠杆菌在SS琼脂上生长较差甚至不生长，所以大肠杆菌在伊红美蓝培养基上生长良好，一般生长为带有金属光泽的紫黑色菌落。本菌能分解葡萄糖产气，还可发酵海藻糖、乳糖、麦芽糖、阿拉伯糖，一些菌株能分解蔗糖，也有一部分细菌不分解蔗糖，大肠杆菌几乎不分解尿素，不产硫化氢，靛基质和甲基红为阳性，枸橼酸盐和VP试验为阴性[2]。大肠杆菌的主要三种抗原可以帮助鉴定其血清型。这三种抗原分别为O、K、H抗原。耐热菌体抗原是O抗原，对热敏感抗原是K抗原，对热敏

8、感的鞭毛蛋