心理应激在幽门螺杆菌感染胃黏膜过程中的作用

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1、心理应激在幽门螺杆菌感染胃黏膜过程中的作用【摘要】　　目的：探讨心理应激在幽门螺杆菌（helicobacterpylori,Hp）感染胃黏膜过程中的作用。方法：选用哥伦比亚培养基培养幽门螺杆菌并鉴定；40只小鼠随机分为双重因素组、单纯Hp组、单纯应激组、对照组，通过Hp菌液灌胃和电击造模，观察胃黏膜损伤情况。结果：双重因素组、单纯Hp组、单纯应激组与对照组胃黏膜炎症损伤评分比较，差异均有统计学意义（P<0.01)；而Hp与心理应激在引起胃黏膜损伤中其协同作用显示无统计学意义(P=0.38)。结论:Hp、

2、心理应激都可引起胃黏膜损伤，但两者在引起胃黏膜损伤的过程中是相互独立的因素。【关键词】幽门螺杆菌；心理应激；胃黏膜损伤；小鼠　　［Abstract］Objective:ToexploretheeffectsofpsychologicalstressinthepathogenesisofHelicobacterpylori(Hp)infectinggastricmucosa.Methods：HpgrebiamediumandthenicelydividedintoHp+psychologicalstressgr

3、oup,Hpgroup,psychologicalstressgroupandcontrolgroup.Themodelsucosa.Results:Thereucosainflammation(P<0.01),butthereucosa,buttheyplefactorsinthepathogenesis.　　［Keyucosalinjury;mice　　幽门螺杆菌（Helicobacterpylori，Hp）感染是慢性活动性胃炎、消化性溃疡等胃部疾患的主要病因，并且与胃癌的发生密切相关，被m。制作细

4、菌涂片，革兰染色后，显微镜下观察。典型的Hp为革兰染色阴性，海鸥状、弧形或S形。生化反应采用尿素酶反应、氧化酶及触酶试验，观察颜色改变。　　本实验以本室保存的标准株NCTC11637作为阳性对照。　　1.3实验方法　　将实验动物随机分成4组，即双重因素组、单纯Hp组、单纯应激组、对照组。前两组用Hp菌液灌胃，0.4ml/只(约含Hp为109个/ml)，所有动物灌胃前禁食12h、禁水4h，隔日1次，连续5次，10天完成［4］；应激和对照两组同时同量给予生理盐水灌胃，灌胃后自由摄食和饮水。双重因素组和应激组在距末

5、次灌胃4周后给予心理应激，具体操作：将两组小鼠逐个放入自制的鼠笼，鼠笼底部布有导电的铜丝，相邻两根铜丝通以不同的电极，小鼠一旦接触到两根不同极性的铜丝就被电击，控制调压器，电压在20～80Ⅴ之间，使小鼠每天接受大小不同的电击10次(以两个人同时观察到小鼠被电击后出现惊跳为一次)，从而使小鼠产生恐惧、紧张、焦虑甚至愤怒等情绪，连续4天。单纯Hp组和对照组小鼠同天也放入自制的鼠笼，但不通电源。所有小鼠4天后全部以脊椎脱臼法处死，处死前禁食、禁水12h。分离胃组织，将其沿胃大弯纵向剪开，用无菌生理盐水洗净胃内残留物

6、，纵向一分为二，一半用于快速尿素酶试验，另一半以10%甲醛固定，石蜡包埋，5μm切片、染色用于Hp定植评价和炎症程度的评价。　　1.4Hp定植和胃黏膜炎症的评价　　组织活检标本分别行快速尿素酶试验及石蜡包埋切片。按文献报道方法进行甲苯胺蓝染色［5,6］，观察标本Hp定植情况，HE组织学切片染色进行组织炎症及炎症活动度的评价。　　1.5胃黏膜炎症的组织学评价标准　　慢性胃炎组织学形态的分类标准［7］是以慢性炎症细胞密集的程度和浸润深度分为4度:①无明显异常，每高倍视野单核细胞不超过5个，或数量略超过正常而镜下无

7、明显异常；②轻度，慢性炎症细胞较少并局限于黏膜浅层，不超过黏膜层的1/3；③中度，慢性炎症细胞较密集，超过黏膜层1/3，达2/3；④重度，慢性炎症细胞密集，占黏膜全层(计算密度程度要避开淋巴滤泡及周围淋巴细胞区)　　1.6统计学处理　　采用SPSS16.0软件进行统计，Hp感染率的比较采用卡方检验，Hp与心理应激在引起胃黏膜损伤中的作用比较采用两因素析因设计方差分析，P<0.05为差异有统计学意义。　　2结果　　2.1幽门螺杆菌的培养与鉴定　　培养96h的HpNCTC11637经革兰染色后，显微镜下可见

8、海鸥状、弧形、S形的革兰阴性菌；尿素酶、氧化酶、触酶试验均阳性。　　2.2Hp感染情况　　小鼠灌胃5周后，3个观察组小鼠各被咬死1只，其余小鼠解剖取胃组织进行快速尿素酶试验，双重因素组和Hp组尿素酶试验阳性(颜色在半小时内改变)，应激组和对照组尿素酶试验阴性；所有胃组织进行甲苯胺蓝染色，双重因素组和Hp组小鼠发现胃组织表面的黏液及胃小弯顶部胃组织可见不等量Hp定植（图1）；应激组和对照组小鼠胃组织未