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《右归丸对骨髓抑制小鼠骨髓细胞周期和凋亡的影响论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、右归丸对骨髓抑制小鼠骨髓细胞周期和凋亡的影响论文郑轶峰，姜建青，张力华，石娅萍，黄茜【摘要】目的观察右归丸对骨髓抑制小鼠外周血、骨髓细胞周期和凋亡的影响,探讨其可能造血调控作用机制。方法用全自动血细胞分析仪、白细胞计数法和流式细胞术(FCM)分别检测右归丸对骨髓抑制小鼠外周血、骨髓有核细胞数以及骨髓细胞周期和调亡的影响。结果右归丸中、高剂量均能明显升高外周血红细胞（RBC）、血红蛋白（Hb）、骨髓有核细胞(BMC)数，右归丸高剂量对血小板(PLT)和白细胞(期细胞的转化,从而导致G2/M期细胞比例明显升高
2、,增殖指数(PI)也明显升高。中、低剂量组右归丸的骨髓细胞凋亡比例显著下降。结论右归丸可能通过促进骨髓细胞修复受损的DNA，加速通过G1/S和S期监测点，进行增殖和分化；抑制造血细胞的凋亡；调节造血细胞增殖与凋亡之间的平衡等机制.freelarroyelosuppressedmiceandtodiscussitspossiblemechanisminhematopoieticregulation.MethodsAutomaticbloodcellanalysator,etry(FCM)arroarroye
3、losuppressedmice.ResultsPeripheralredbloodcells,hemoglobinandbonemarroiddleorhighdoseYouGuiphase,thusledtoahighercellproportioninG2/MphaseasiddleorloarroaypromotetherecoveryofhemopoieticfunctionofinjuredbonemarroagedDNAanditcanaccelerateGO/G-SphaseandS-G2
4、/Mphasetransition,activatetheproliferationanddifferentiation,inhibittheapoptosisofhemopoieticcellsandregulatethebalancebetyelosuppressionbonemarroa公司产品)；60Coγ射线放射源(四川省肿瘤医院放疗科提供)；全自动血细胞分析仪BC-3000Plus型（深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司）；流式细胞仪(EPICSXL型,Beckman-Coulter公司)。1.2
5、方法1.2.1骨髓抑制动物模型的制备参照严苏纯等(4)的方法造模。小鼠经2.0Gy60Co照射后的第4d开始，每天腹腔注射环磷酰胺(CTX)50mg/kg(于临用前配制)，连续给药3d完成模型制备。1.2.2动物分组与给药将小鼠随机分为正常对照组、模型组、右归丸低剂量组、中剂量组、高剂量组和阳性对照组，每组8只。除正常对照组外,其它5组均进行造模。小鼠造模完成的第2d开始给药,正常对照组和模型组每只灌胃0.2ml/10g/d的生理盐水；低剂量、中剂量和高剂量右归丸组分别给右归丸2.25g/kg、4.5g/
6、kg和9.0g/kg,每只小鼠灌胃0.2ml/10g/d,阳性对照组每日腹腔注射重组人粒细胞集落刺激因子（G－CSF）150ug/kg，共给药7d。1.2.3外周血细胞计数最后一次给药后24h，经小鼠眼球后静脉丛采血0.1ml，用BC-3000Plus型全自动血细胞分析仪进行血常规检测。1.2.4骨髓有核细胞悬液的制备最后一次给药后24h,以颈椎脱臼法处死各组小鼠,取出股骨,剔除肌肉和结缔组织,剪开股骨两端,用6号针头以生理盐水液冲出骨髓细胞,再用4号针头过滤制成单个骨髓细胞悬液。取部分骨髓细胞悬液在显微
7、镜下按白细胞计数法进行骨髓有核细胞计数。1.2.5细胞周期样品制备将上述单个骨髓细胞悬液离心(1000r/min,5min)，弃上清，用PBS洗涤两次，去上清液，滴入70%冷乙醇固定细胞，立即混匀，用封口膜封口，放置4℃冰箱冷藏备用。1.2.6细胞周期分析和凋亡细胞测定取上述70%冷乙醇固定的细胞样品,用PBS洗两次,以洗去残留的乙醇,加100μlPBS后混匀,加碘化丙锭染液1ml染色30分钟(4℃,避光30min),上流式细胞仪检测细胞周期的变化和凋亡细胞的比例。结果以细胞周期各时相细胞百分率表示，并按
8、公式:PI=(S+G2/M)/(G0/G1+S+G2/M)×100%计算细胞增殖指数(proliferationindex,PI)。1.3统计学方法实验所得数据用表示，各组数据先行方差齐性检验，再进行单因素方差分析，α=0.05。2结果2.1右归丸对骨髓抑制小鼠外周血及骨髓有核细胞的影响由表1可见：与正常组相比，模型组白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板、骨髓有核细胞均明显降低(P0.01)。与模型组相比教，右归丸中、高剂量的红细
