第一节 血清三碘甲状腺原氨酸测定

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1、第一节血清三碘甲状腺原氨酸测定文件编号：版本号：页码：第页共页1检测方法和原理三碘甲状腺原氨酸（3,5,3’-L-triiodothyronine，T₃）是直接由甲状腺合成和分泌（占大约20%）的，以及外围T₄转化为T₃（占大约80%）一种激素。T₃测定采用直接化学发光技术的竞争免疫测定法，检测原理为：患者血样中的T₃与一种T₃类似物竞争数量有限的、存在于标记试剂中带吖啶（acridinium）酯标志的鼠单克隆抗T₃抗体，上述T₃类似物在固相试剂中与顺磁离子共价结合。病人血样中的T₃含量与系统所检测的光亮

2、指标（RLUs）强度呈现一种反比关系。2标本采集及与干扰因素2.1采血方法不抗凝静脉血2~3ml2.2标本保存室温保存，及时送检和检测。不得使用在室温中保存8h以上的血样。若分析试验不能在8h之内完成，应使用无菌盖盖严标本并将其置于2~8℃的环境保存。若血样不能在48h之内进行分析，应将其置于—20℃的环境中冷冻保存，可稳定1个月。标本只能冷冻一次，并且在解冻后应允充分混匀。2.3注意事项推荐选用血清。人血清中的异嗜抗体可与免疫球蛋白试剂发生反应，从而干扰实验室中的免疫测定结果。经常与动物或动物血清产品接

3、触的患者易于受到上述因素影响，因此其检测结果可能会出现异常值，在进行诊断时应获取更多信息。胆色素>342μmol/L（20mg/dl）、血红蛋白>2.5g/L(250mg/dl)、三酰甘油>26mmol/L(1000mg/dl)有明显干扰。标本应避免乳糜、溶血、黄疸。3试剂和设备3.1试剂SIEMENS原装配套试剂。3.1.1试剂组成：T3Lite试剂和T₃固相试剂、T₃辅助试剂。T₃Lite试剂：吖啶酯标记的单克隆鼠抗人T₃抗体（300ng/管），含叠氮钠（0.1%）、ANS、巴比妥钠缓冲液。T₃固相试

4、剂：与磁性颗粒共价结合的T₃类似物（200μg/管），含叠氮钠（0.1%）ANS、巴比妥钠缓冲液。3.1.2试剂准备：手工混合所有试剂包，肉眼检查试剂包底部以确保所有颗粒分散均匀并处于悬浮状态。然后将混合物载入系统直接使用。若使用新批号试剂，需在主界面选择Calibration，选择MasterCurveDefinition。在Calibration-MasterCurve窗口，选择ScanData，第一节血清三碘甲状腺原氨酸测定文件编号：版本号：页码：第页共页用扫描器扫描主曲线，扫描后点击Save（注意

5、，用扫描器扫描时，不要停或回扫，一直扫完条码为止）。3.1.3试剂储存：2~8℃冷藏保存，并保持竖直向上。3.1.4注意事项：叠氮钠与铜、铅形成易爆的金属叠氮钠化合物，处理废液时应用大量水冲洗稀释以防叠氮钠的产生。上述试剂不能口服，万一沾至皮肤应立即用清水及肥皂水冲洗。所有试剂应按照潜在传染性的物质处理。3.2控制品SIEMENS原装配套质控品LigandPlus1，2，3.3.3校准品SIEMENS原装配套校准品A3.4仪器SIEMENSADVIACENTAUR全自动化学发光免疫分析仪。4操作程序4.1

6、检测流程签收标本→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。4.2标本签收严格按标本接收程序签收标本。4.3标本处理标本在离心机上以2500~3000r/min，离心6~10min，分离血清上机测定。若标本不能及时检测，将分离的血清冷藏于2~8℃的冰箱里。4.4标本检测4.4.1手工编排测试项目：适用于无条形码标本或标本复查，在Worklist窗口，点击Schedule→点击SchedulebyRack，输入样品架子号，后加A~E→点击Ente，输入ID号，选择项目组合或测试项目→点击Save保存。4

7、.4.2双向条形码标本分离血清后直接上机检测。4.4.3运行：将已装载样品管的架子置于样品录入区，启动录入区。4.5检验后标本保存标本检测后密封盖好，保存在标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7d。5校准程序5.1校准品准备和存储将校准品A从冰箱中取出，加5.0ml蒸馏水复融，轻轻旋转摇匀，室温放置30min，待充分混匀后分装，—20℃冰冻保存至少20d，复融后2~8℃可稳定24h。5.2校准条件第一节血清三碘甲状腺原氨酸测定文件编号：版本号：页码：第页共页在室内质控失控，使用新批号试剂、更换仪器主要配件或

8、进行大保养后均需校准。无特殊情况时校准周期为28d。5.3校准程序使用新批号校准液时，需在主界面，点击Calibratior，选择CalibratorDefinition。在Calibration-CalibratorDefinition窗口，选择ScanData，用扫描器扫描校准曲线，扫描后，核对数据正确后，保存数据。将复融后的高、低水平校准品A置于样品架上，并确认低定标液之前放置。在Worklist窗口，点击Schedul