游离三碘甲状腺原氨酸测定sop

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1、文件名称：游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）测定SOP版次：（共页）文件编号：批准者：编写者：审核者：生效日期：1.目的规范游离三碘甲状腺氨酸（FT3）测定程序，确保检测结果的准确性。2.测定方法竞争性结合酶免疫检验。3.测定原理AccessFreeT3测定是一种竞争结合免疫法测定，将样本添加到含碱性磷酸酶结合物抗T3单克隆抗体的反应管中。在温育过程中，样本中的游离T3与抗T3抗体发生反应。然后将包被着链霉亲和素和生物素化T3相似物的微粒添加到混合物中。抗T3抗体上的未结合位点通过T3相似物与微粒相结合。在反应管内温育

2、完成后，结合在固相上的物质将置于一个磁场内被吸住，而未结合的物质被冲洗除去。然后，将化学发光底物Lumi-Phos*530添加到反应管内，然后由照度计对反应中所产生的光进行测量。所产生光的量与样本内游离T3的浓度成反比。样本内分析物的量由所储存的多点校准曲线来确定。4.性能参数无须输入操作参数，仪器根据预设的分析项目参数和试剂条码的信息自动进行分析。标本量125µL。4.1精密度：批内CV＜12.5％。4.2分析范围：0.3~30.0pg/ml(0.4~50.0pmol/L)。4.3灵敏度：0.3pg/ml。4.4

3、方法的有限性及干扰因素：胆红素10mg/L、TG18g/L、肝素、Hb2.5g/L在检测允许的精密度范围内对结果没有影响。5.原始样本系统5.1总则：符合本室《检验标本采集手册》5.2常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。5.3检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。5.4急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。5.5标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。5.6标本拒收标准5.6.1标本量过少。5.6.2

4、检验申请单上姓名或条码与标本上姓名或条码不一致。5.6.3检验项目与标本类型不符，或抗凝剂不符。5.6.4标本送检时已放置时间过久。5.6.5输液时在同侧血管抽血。5.6.6标本严重容血或脂血。5.6.7无标本（空管）5.6.8条码包含信息不全（如无采样时间等）。6.标本保存6.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清,避免溶血。6.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定8h，普通冰箱中（2～8℃）稳定48h。需较长时间保存应将血清存放于-20℃。冰冻标本仅可冻融一次。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对

5、保存时间超过1d的标本均密闭保存。6.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置2～8℃冰箱内保存7d。7.设备和试剂7.1设备：美国BeckmanCoulter公司DXI800免疫分析系统。7.2试剂：ACCESS专用FT3测定试剂盒，由美国BeckmanCoulter公司出品，产品号33830。未打开的试剂包保存于2～8℃在效期内稳定，不可冻存。开启的试剂包载入系统中可使用28d。7.3试剂盒组分7.3.1磁性微粒子：包被了链亲和素的磁性微粒子，和Tris缓冲液。7.3.2液体试剂：鼠抗T3单克隆抗体-ALP结合物

6、和Tris缓冲液。7.3.3　结合于生物素上的T3类似物，Tris缓冲液。7.3.4　0.4NNaOH，和0.4NHCl。7.3.5　试剂包即开即用，无须特殊准备。7.4其他试剂与用品7.4.1化学发光底物：ACCESS的通用发光剂底物液，Cat.No.81906。7.4.2清洗缓冲液、反应杯等。8.校准程序8.1校准品:美国BeckmanCoulter公司提供的FT3配套校准液需贮2～8℃。5个浓度。有校准卡片。8.2校准类型和校准点数目：非线性模式，6个校准点。8.3校准周期：在同一批号试剂的使用效期内校准曲线

7、有效，但在间隔14d后需要重新校准。每当：①更换试剂批号或出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；③仪器的重要零件更换后，进行一次校准。8.4校准液重建方法：液体试剂，直接使用。9.质量控制程序9.1质控品：采用美国BeckmanCoulter公司提供配套的质控品。9.2质控液准备9.2.1小心打开瓶盖，避免内容物的任何损失。9.2.2在20～25℃的室温下，准确吸取5ml蒸流水复容1瓶质控血清。9.2.3盖上橡皮塞，拧紧瓶盖，使用前避光30分钟。9.2.4轻轻旋转，确保所有的冻干物完全溶解。9.2.5勿摇晃小瓶。9

8、.2.6分装致离心管中，每管0.5ml-20℃保存。9.3　质控品测定：在每一批标本中测定质控血清一次。9.4质控规则：采用L-J质控图，以±3s为失控限。标准差由本室实验数据得出。9.5如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。10.检验程序步骤装载试剂→进行校准→进行质控→输入标本检测