高效液相色谱技术在食品检测中应用

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1、高效液相色谱技术在食品检测中应用【摘　要】高效液相色谱(HPLC)也叫高压液相色谱，是在经典液相色谱法的基础上，于20世纪60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。HPLC分离效能高、分析速度快、检测灵敏度高，能分析高沸点，但不能气化热不稳定的生理活性物质，基于这些特性被广泛应用于食品检测领域。【关键词】高效液相色谱分析；食品检测；应用1.HPLC在食品添加剂领域的应用1.1食品甜味剂的检测甜味剂是指能够赋予食品甜味的食品添加剂。按其营养价值可分为营养型与非营养型甜味剂，通常所讲的甜味剂系指人工合成的

2、非营养型甜味剂，如糖精钠、环己氨基磺酸钠(甜蜜素)、乙酰磺胺酸钾(安塞蜜)和天冬酰苯丙氨甲酯(甜味素和阿斯巴甜)等。目前，糖精钠价格低廉，应用广泛，但过量添加会损害人的健康。采用液相色谱-气相色谱联用技术，6SpherigelC18色谱柱，电喷雾负离子采集模式，甲醇-甲酸-三乙胺缓冲盐梯度洗脱，定量测定果冻等食品中安赛蜜、糖精钠和甜蜜素含量，结果加样回收率为93.19%～100.90%，相关标准偏差(RSD)为1.05%～2.04%。该方法选择性好，定性定量准确，分析时间短，同时也适用于饮料等其他食品的定性

3、定量检测。用高效液相色谱-荧光法(HPLC-FLD)测定食品中的糖精钠，最低检出限在0.005～0.200mg/ml，与高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV)相比较，HPLC-FLD法重现性好，准确度更高，由于FLD的选择性响应，降低了对色谱柱的性能要求，更适合复杂样品的快速分析，使其具有比UV法更高的可靠性，是一种较为理想的糖精钠检测方法。1.2食品防腐剂的检测常用的防腐剂有苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钠盐等，因其具有毒性小的特点，故国标法中允许一部分食品中加入少量的防腐剂。但防腐剂的富集对人体机能会产

4、生一定的影响，所以食品中防腐剂含量的测定显得非常重要。6利用HPLC测定含乳饮料中苯甲酸的含量。用Zn(Ac)2和KFe(CN)3溶液作为沉淀剂进行样品的预处理，磷酸盐缓冲液和甲醇混合溶液为流动相，C18色谱柱，于波长225nm处紫外检测，方法简单快速、灵敏度高，既适用于大部分含乳饮料，也适用于纯牛奶的测定。苏爱梅采用加沉淀剂沉淀法对火腿肠样品进行预处理，过滤后用RP-HPLC法测定火腿肠中防腐剂苯甲酸和山梨酸的含量。色谱柱为Symetry-C18，以0.02mol/L乙酸铵-甲醇(97∶3)为流动相，检测

5、波长为230nm。苯甲酸和山梨酸浓度在0～0.05g/L范围内线性很好(r=0.9996)；山梨酸最低检出限为0.024g/L，平均回收率为100.4%，RSD为0.68%。1.3食品色素的检测目前已经公认人工合成食用色素应逐步限制使用，但值得注意的是，在我国至今仍有少数不法商人，超标准使用人工合成食用色素，甚至利用不能用作食品添加剂的染料，严重地危害了人们的健康。采用HPLC法测定保健食品黄金搭档包衣片中食用合成色素，样品前处理用粉碎提取法和漂洗法，聚酰胺吸附纯化LichrospherC18柱，甲醇-乙酸

6、铵流动相梯度洗脱，单波长或多波长测定柠檬黄、靛蓝和诱惑红3种色素。其线性范围宽(0～100g/ml)，回收率高(91.3%～103.1%)，重现性好(RSD=2.11%～5.63%)，最低检出限为2～11ng。其中，尤以粉碎提取法，梯度洗脱，多波长检测效果更佳。2.HPLC在食品营养成分领域的应用2.1碳水化合物的检测对于碳水化合物的测定，HPLC法操作简便，灵敏度高，可同时测定各种糖，国际上已将HPLC法作为酒类糖分含量测定的仲裁法。2.2氨基酸的检测6氨基酸是生物体中重要的生命物质，是组成酶和蛋白质的基

7、本单元，准确灵敏地测定食物中氨基酸的含量具有十分重要的意义。目前，柱前衍生化高效液相色谱法以其灵活和易于推广的特点。采用邻苯二甲醛(OPA)-9-芴甲基氯甲酸酯(FMOC)进行氨基酸柱前衍生，RP-HPLC法测定氨基酸含量。3个不同浓度梯度的氨基酸标准溶液线性关系良好，样品保留时间绝对误差小于0.1min，重现性RSD值低于4%，加标回收率均在90%～110%。2.3脂肪酸的检测脂肪酸是指一端含有一个羧基的长的脂肪族碳氢链，是有机物。饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸和三脂酰苷油磷脂卵磷脂等，对人体的健康起到了重要的

8、作用。用HPLC法与基质辅助激光解吸电离飞行时间技术联用，分析蛋黄中磷脂粗提物。将从蛋黄中提取的多种磷脂通过HPLC预先分离，收集各组分后分别进行MALDI-TOF-MS分析得到比较清晰的质谱图。选用RP-HPLC与电容耦合非接触电导检测(C4D)结合的方法分离测定肉蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、油酸与亚油酸5种未衍生化长链脂肪酸，采用HypersilODSC18色谱柱，以甲醇-1mmol/L醋酸钠(78∶22，V/V)