哮喘儿童外周血t淋巴细胞fas-fasl的表达及其意义

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时间:2018-07-07

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1、哮喘儿童外周血T淋巴细胞Fas/FasL的表达及其意义:袁岳沙陈杰王琳周少华【摘要】  目的探讨哮喘儿童外周血T淋巴细胞Fas、FasL表达及其意义。方法21例哮喘发作期患儿、15例哮喘缓解期患儿及25例正常儿童作为研究对象;密度梯度法分离外周血淋巴细胞;免疫荧光抗体法检测淋巴细胞Fas、FasL表达阳性率;用t检验和直线相关分析进行资料统计处理。结果发作期患儿淋巴细胞Fas表达明显下降,与正常对照组和缓解期患儿组比较差异均有非常显著意义(t=5.9142,3.1084,P<0.01);缓解期患儿淋巴细胞

2、Fas表达比发作期患儿有明显提高,但与正常组相比仍有显著降低(t=2.3388,P<0.05);淋巴细胞FasL表达总体均较低,但在发作期患儿仍明显高于正常对照组(t=2.1861,P<0.05),在缓解期患儿FasL表达虽高于正常对照组,但无统计学意义(t=1.7724,P>0.05);发作期患儿外周血中表达Fas的淋巴细胞阳性率与淋巴细胞比率呈明显的负相关(r=-0.632,P<0.05),而表达FasL的淋巴细胞阳性率与淋巴细胞比率间无明显相关性。结论哮喘发作期和缓解期儿童存在淋巴

3、细胞凋亡下降,这可能是哮喘患儿气道慢性炎症持续存在的原因;同时提示在缓解期患儿仍需继续维持治疗。【关键词】哮喘儿童淋巴细胞Fas(CD95)FasL  Abstract:ObjectiveToinvestigatedtheexpressionofFas/FasLonperipheralbloodTcellsinasthmaticchildrenandtoexploretherelationshipbetphocytesethodandTlymphocytesmunofluoresencetechnology.R

4、esultsExpressionofFasonTcellsin21casesofthestageofattack(5.81±3.29)andin15casesofremissionstage(9.86±4.54)arkablyloalcontrolgroup(2.31±1.05)(P<0.05)butthoseinremissionpatients(2.97±1.28)arkablenegativerelationshipbetphocyte(r=-0.632,P<0.01).ConclusionT

5、heapoptosisofperipheralbloodTlymphocytesfromthechildrenabothinstageofattackandremissionaredecreased.Theinhibitedapoptosismightbeoneofreasonsforthechronicpersistentinflammationintheairaticchildrenandsuggeststhatitisnecessarytocontinuetherapyinremissionstage. 

6、 Keya;Child;Lymphocyte;Fas;FasL  支气管哮喘以可逆性气道阻塞、气道高反应性、气道炎症为其三大主要特征,其中以气道炎症为最主要的病理变化,并决定气道阻塞和气道高反应性的程度[1]。这种气道慢性变态反应性炎症是以嗜酸细胞、淋巴细胞及肥大细胞浸润为主的。最近研究表明,淋巴细胞凋亡与激活的调节失衡可能起到重要作用[2]。本课题组近期对哮喘儿童外周血T淋巴细胞Fas/FasL表达的变化进行了研究,以探讨其在哮喘中的作用。  1对象与方法  1.1对象哮喘发作期21例,男14例,女7例,年龄

7、3~12岁;缓解期15例,男9例,女6例,年龄3~12岁;所有患儿均符合全国哮喘诊断标准[3],均于采血前1周内未使用糖皮质激素。同期体检健康儿童25例作为对照,男14例,女11例,年龄3~12岁。  1.2方法外周血淋巴细胞分离:无菌取静脉血肝素抗凝,加等量Hanks液稀释,用Ficoll淋巴细胞分离液分离,用含10%胎牛血清(FBS,Sigma产品)的RpMI1640培养液(GIBCO产品)配成细胞悬液,细胞浓度为5×109/L,于培养瓶中37℃贴壁培养2h,用无菌尼龙棉柱37℃作用30min,分离出T淋巴

8、细胞,其纯度>90%,锥虫蓝拒染试验活细胞数>90%。  淋巴细胞Fas/FasL的表达:重悬的淋巴细胞离心,去上清,分别与鼠抗人Fas、FasL单克隆抗体于4℃孵育,以非免疫鼠IgG作为阴性对照,45min后洗涤细胞,加入异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗鼠IgG(抗体均为pharMingen产品),于4℃避光孵育45min,洗涤细胞,检测阳性细胞率。  1.3统计学处理淋巴细胞F

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