黔产野生及栽培钩藤中生物碱类成分薄层色谱研究探究

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1、黔产野生及栽培钩藤中生物碱类成分薄层色谱研究探究摘要目的：为考察贵州野生和栽培钩藤药材质量的稳定性和一致性，建立薄层色谱特征图谱。方法：硅胶G薄层板；氯仿―丙酮―氨水(50∶20∶0．3)为展开剂；稀碘化铋钾溶液为显色剂；双波长锯齿扫描，检测波长520nm，参比波长650nm。结果：不同样品均含有生物碱，其薄层色谱特征图谱显示一定的相似性和差异性。结论：该方法可以有效地鉴别钩藤药材，并为质量评价提供依据。�关键词钩藤生物碱薄层色谱��钩藤为茜草科植物钩藤Uncariarhynchophylla(Miq.)Jacks.、大叶钩藤Uncariamacr-ophyllaWall.

2、、毛钩藤UncariahirsutaHavil.、华钩藤Uncariasinensis(Oliv.)Havil.或无柄果钩藤Uncariasessilifructus6Roxb.的干燥带钩茎枝。用于头痛眩晕，感冒夹惊，惊痫抽搐，妊娠子痫，高血压等［1］。化学研究表明，钩藤茎枝中含有多种吲哚类生物碱，其中钩藤碱、异钩藤碱为其主要有效成分［2］。现代药理研究表明，钩藤具有降压、抗心律失常、镇静、抗癫痫和抗癌等多种药理作用［3］。质量评价方面，《中国药典》一部（2005版）尚未收载其薄层鉴别和含量测定方法。因此为了考察钩藤药材的质量是否稳定和一致，我们建立了其薄层色谱特征图谱。1

3、仪器及试药�CS-9301PC双波长飞点薄层色谱扫描仪（日本岛津公司），CAMAGLINOMATV半自动点样仪（瑞士卡玛公司），CX-300型超声波清洗机（中国北京创新德超声电子研究所），硅胶G薄层板（中国青岛海洋化工厂）。钩藤、华钩藤、毛钩藤和攀枝钩藤由贵阳中医学院药学系生药教研室付志明老师采集于贵州省贵阳市、剑河县、三都县（见表1），并经贵阳中医学院药学系生药教研室刘�教授鉴定。钩藤对照药材（批号1190-200101）购自中国药品生物制品检定所，氯仿、丙酮、氨水等试剂均为分析纯。�2方法和结果2．1对照品溶液的制备取钩藤对照药材粉末3．0g，用0．1mol・L-1浓氨

4、试液浸润（2h以上），用30ml氯仿超声提取40min，过滤，滤液水浴挥干，残渣用3．6％HCl超声溶解，过滤，滤液用浓氨水调pH9～10，用氯仿萃取3次，每次5ml，氯仿水浴挥干，残渣用2ml氯仿溶解，作为对照品溶液。2．26供试品溶液的制备分别取各地采集的钩藤药材粉碎至中粗粉（过40目筛），称取3．0g，用0．1mol.L-1浓氨试液浸润（2h以上），用30ml氯仿超声提取40min，过滤，滤液水浴挥干，残渣用3．6％HCl超声溶解，过滤，滤液用浓氨水调pH9～10，用氯仿萃取3次，每次5ml，氯仿水浴挥干，残渣用2ml氯仿溶解，作为供试品溶液。2．3薄层色谱试验条件硅

5、胶G薄层板（100mm×100mm；100mm×200mm），点状点样，点样量10μl。展开剂为氯仿-丙酮-氨水（50∶20∶0．3），展开，晾干后，喷以稀碘化铋钾溶液至斑点显橙红色［4］，加同样大小玻璃板密封。反射法双波长锯齿形扫描，λS=520nm,λR=650nm,狭缝0．4mm×0．4mm。2．4薄层色谱试验结果依照上述试验条件获得的色谱图像见图1、图2，从色谱图上可以观察到钩藤对照药材的5个生物碱斑点，其他黔产钩藤药材中均含有生物碱，但斑点的大小和Rf值各异，有与对照药材在相同位置上显相同颜色的斑点，也有与对照药材在不同位置上的相同颜色的斑点，显示了钩藤各品种药材

6、质量的差异性。为了提高辨认的专属性，还将黔产各品种钩藤药材和钩藤对照药材进行了薄层色谱扫描图的叠加，见图3。2．56钩藤生物碱类成分薄层色谱特征图谱建立及识别钩藤生物碱类成分的薄层色谱图像以可见光色谱信息最丰富（图1、图2），荧光色谱不明显。在可见光色谱图中，可以明显观察到钩藤对照药材的5个大小不等的橙红色斑点，其编号及Rf值用Px(Rf)表示，依次为P1（0．18）、P2（0．25）、P3（0．37）、P4（0．56）、P5（0．66）；野生的钩藤、毛钩藤、攀枝钩藤均可观察到3个不同大小的橙红色斑点，且分别是与对照药材相对应的P1（0．18）、P2（0．25）和P4（0．

7、56）斑点；而野生的华钩藤则可以观察到4个大小不等的橙红色斑点，分别是P2（0．25）、P4（0．56）、P5（0．66）和P6（0．47），其中P2（0．25）、P4（0．56）、P5（0．66）是与钩藤对照药材的共有斑点，P6（0．47）则是其特有斑点；栽培的华钩藤可以观察到3个大小不等的斑点，分别是P2（0．25）、P5（0．66）和P6（0．47），P2（0．25）、P5（0．66）为共有斑点，P6（0．47）为特有斑点。共有斑点说明了各品种药材所含有的相同化学成分，特有斑点则表明其特有的化学成分，斑点大小