空心莲子草的高效液相色谱指纹图谱研究论文

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1、空心莲子草的高效液相色谱指纹图谱研究论文.freelaC18色谱柱（250mm×4.6mm.freel），流动相为乙腈-0.12％磷酸水溶液系统，线性梯度洗脱，检测波长345nm，进样量为10μl。结果建立了空心莲子草药材的HPLC指纹图谱，确立了空心莲子草药材指纹图谱中的17个共有峰，计算了12批空心莲子草药材指纹图谱与对照图谱的相似度。结论所建立的HPLC指纹图谱有很好的精密度、重复性和稳定性，能够用于空心莲子草药材的质量控制。【关键词】空心莲子草；高效液相色谱；指纹图谱Abstract：ObjectiveToestablisha

2、nHPLCfingerprintanalysismethodofAlternantheraphiloxeroides.MethodsChromatographicfingerprintofAlternantheraphiloxeroidesodeatographicseparation.Datailarityevaluationsoftilarityofthesamples.ResultsTheHPLCfingerprintofAlternantheraphiloxeroidesinarily.17characteristicpeak

3、silarityamong12batchesofAlternantheraphiloxeroidesfromdifferentaerahavebeendetermined.ConclusionHPLCfingerprintmethodisrepeatableandcanbeusedforthequalitycontrolofAlternantheraphiloxeroides.Keyaramthaceae）莲子草属多年生宿根草本。原产于南美洲，20世纪初期引种于我国，后逸为野生，现广泛分布于我国北纬44°以南、东经97°以东的海拔低且

4、气候相对较暖湿的广大地区。空心莲子草药用全草，被广泛应用于民间。据《中药志》（第2版）记载：“空心莲子草性苦味寒，具有清热、凉血、解毒的功效，用于流感、麻疹、乙型脑炎、流行性出血热、疔疮、湿疹、毒蛇咬伤等。”国内对空心莲子草的研究工作刚刚开展，目前已知空心莲子草中主要含有甾体类、三萜类、黄酮类和蒽醌类等多种成分。本实验采用反相高效液相色谱法建立空心莲子草药材的指纹图谱分析方法，测定了国内10批药材的指纹图谱，并与美洲引种国内栽培的两个样品进行了比较。1仪器与试药1.1仪器Agilent1100Series高效液相色谱仪（G1322A脱

5、气机，G1311A四元泵，G1316A柱温箱，G1314A紫外检测器）Agilent液相色谱工作站；METTLERTOLEDOAL204万分之一分析天平，KQ-250B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），HH-S型水浴锅（郑州长城科工贸有限公司）。1.2试药乙腈（天津市科密欧化学试剂有限公司）、95％乙醇（上海振兴化工一厂）、乙醚（国药集团化学试剂有限公司）、醋酸乙酯（天津市化学试剂三厂）、甲醇（上海振兴化工一厂）均为分析纯，水为二次蒸馏水。1.3药材来源实验用药材共计12批，其中10批来源于国内，由我室人员于2005年夏秋两季

6、采自南方各省，取其地上部分，经湖北中医学院中药鉴定学教研室吴和珍副教授鉴定为苋科莲子草属植物空心莲子草的干燥全草；另有两批样品分别由阿根廷和美国引种，栽培于上海，由复旦大学生物多样性科学研究所潘晓云博士提供。所有药材的来源和采集日期见表1。表1药材来源和采集日期（略）2方法与结果2.1色谱条件AlltimaC18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm），柱温25℃，检测波长345nm，进样量为10μl，流动相为乙腈（A）-0.12％磷酸水溶液（B）二元洗脱系统，线性梯度洗脱（以A的百分体积记）：0～40min，20％～20％；40～4

7、5min，20％～24％；45～55min，24％～24％；55～65min，24％～30％；65～100min，30％～100％，体积流量为1.0ml/min。2.2供试品溶液制备取药材粉末约4g，精密称定重量，置于锥形瓶中；精密量取70％乙醇50ml，轻轻振荡，超声处理20min，静置30min后，以70％乙醇补足减失的重量，摇匀，静置后过滤，取续滤液25ml置于蒸发皿中；水浴加热挥去乙醇，用适量蒸馏水溶解，先以乙醚萃取3次（50，40，40ml），弃去乙醚液，水液再用醋酸乙酯萃取3次（50，40，40ml），弃去水液，水浴上挥干

8、醋酸乙酯，残渣用甲醇溶解，定容至2ml；0.2μm微孔滤膜滤过，备用。2.3指纹图谱测定按照上述色谱条件，对10批空心莲子草样品进行测试，截取5～60min的紫外光谱图，对各个峰进行对比分析，确定17个共有峰，记录各共有