川芎嗪注射液对高糖诱导后人腹膜间皮细胞ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶1和金属蛋白酶组织抑制剂1表达的影响的论文

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1、川芎嗪注射液对高糖诱导后人腹膜间皮细胞Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶1和金属蛋白酶组织抑制剂1表达的影响的论文【摘要】目的:研究川芎嗪注射液对体外培养的人腹膜间皮细胞(humanperitonealmesothelialcells,hpmcs)在高糖刺激下ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶1(matrixmetalloproteinase1,mmp1)和金属蛋白酶组织抑制剂1(tissueinhibitorofmetalloproteinase1,timp1)表达的影响。方法:胰蛋白酶消化法从人腹膜组织中分离间皮细胞进行原代培养并传代,分为5组(每组设3个样本):正常组(

2、完全培养液)、高糖对照组(2.5%葡萄糖)和高糖(2.5%葡萄糖)加低、中、高剂量川芎嗪(10、20和40mg/l)组。采用半定量逆转录聚合酶链反应(reversetranscriptionpolymerasechainreaction,rtpcr)法检测细胞内ⅰ型胶原、mmp1和timp1mrna表达;酶联免疫吸附测定(enzymelinkedimmunosorbentassay,elisa)法检测细胞上清液中ⅰ型胶原、mmp1和timp1的蛋白质水平,用二喹啉甲酸(bicinchoninicacid,bca)蛋白检测法测定细胞中蛋白质含量,用以校正eli

3、sa结果。结果:川芎嗪能显著降低高糖所致的hpmcsⅰ型胶原和timp1的表达(p<0.05,p<0.01),两者在蛋白质和基因水平均呈量效关系;且中、高剂量川芎嗪能显著增加mmp1的表达(p<0.05)。.结论:川芎嗪能减少hpmcs高糖刺激下ⅰ型胶原的合成,并且通过调节mmp1/timp1的平衡,促进ⅰ型胶原降解。【关键词】川芎嗪注射液;腹膜间皮细胞;高糖;ⅰ型胶原;基质金属蛋白酶1;基质金属蛋白酶抑制剂1;体外实验zhugs,hejs.jchinintegrmed.2009;7(1):6569.receivedjune18,2008;

4、acceptedjuly22,2008;publishedonlinejanuary15,2009.indexed/abstractedinandfulltextlinkoutatpubmed.journaltitleinpubmed:zhongxiyijiehexuebao.freefulltext(htmlandpdf)isavailableat.for20090110openaccesseffectsofligustrazineinjectiononhighglucoseinducedtypeⅰcollagen,matrixmetalloproteinase1

5、andtissueinhibitorofmetalloproteinase1expressionsinhumanperitonealmesothelialcellsinvitroguisongzhu,jinsonghedepartmentofnephrology,theaffiliateddrumtoedicalschool,nanjing,jiangsuprovince210008,chinaobjective:toinvestigatetheeffectsofligustrazineinjectionontypeⅰcollagen,matrixmetallopr

6、oteinase1(mmp1)andtissueinhibitorofmetalloproteinase1(timp1)expressionsinhumanperitonealmesothelialcells(hpmcs)culturedinhighglucoseconditions.methods:hpmcshumanomentabytrypsindigestionmethodandsubcultured.then,thehpmcsalcontrolgroup,highglucosegroupandhighglucoseplusloediumandhighd

7、oseligustrazine(10,20and40mg/lligustrazinerespectively)groups.semiquantitativereversetranscriptionpolymerasechainreactionmp1andtimp1mrnasinhpmcs.proteinsoftypeⅰcollagen,mmp1andtimp1inculturesupernatantseasuredbyenzymelinkedimmunosorbentassay(elisa).cellprotei

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