硒化麒麟菜多糖抑制人喉癌细胞株hep2增殖的作用

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1、硒化麒麟菜多糖抑制人喉癌细胞株Hep2增殖的作用白雪，林晨，江振友，袁桂秀，沈伟哉，李扬秋，唐渝【摘要】目的通过比较研究海藻麒麟菜多糖粗提物、无机硒化合物亚硒酸钠（Na2SeO3）及其共价化合物硒化麒麟菜多糖对人喉癌细胞株Hep2的作用，探索新的具有抗肿瘤活性的有机硒化合物。方法应用不同剂量的样品作用于Hep2细胞株后，用MTT比色分析法计算肿瘤抑制率。结果硒化多糖对Hep2细胞的抑制率高于相同多糖浓度的麒麟菜多糖和相同硒浓度的亚硒酸钠（P0.05）。硒化多糖的抑制率可高达71.53%，其多糖IC50与硒I

2、C50分别为1805μg/ml和7.0μmol/L，分别低于麒麟菜多糖的多糖IC50(3034μg/ml)和亚硒酸钠的硒IC50(9.0μmol/L)。结论硒化麒麟菜多糖具有抗Hep2细胞增殖的活性，其抑制作用明显优于亚硒酸钠及天然麒麟菜多糖的抗肿瘤活性。【关键词】硒化麒麟菜多糖；亚硒酸钠；HEp2；抗肿瘤　　Abstract：ObjectiveToinvestigateneorseleniumpoundbystudyingtheeffectofEucheumaPolysaccharide(EP),inorgani

3、cseleniumpoundsodiumselenite（Na2SeO3）andorganoseleniumpound－Eucheumapolysaccharideselenide(SeEP)ontheproliferationofhumanlarynxepidermoidcarcinomacelllineHep2invitro.MethodsHEp2cellseasuredbyMTTcolorimetricassay.ResultsTheinhibitoryratiosofSeEParesignificant

4、lyhigherthanthatofEPorNa2SeO3atsomepolysaccharideandselemiumconcentrations（P＜0.05),andreachedto71.53%at4000μg/ml.TheIC50sofSeEPare1805μg/mlbypolysaccharideand7.0μmol/Lbyselenide,lofEPand9.0μmol/LofNa2SeO3respectively.ConclusionSeEPshooreffectonHEp2cells,anditis

5、morepotentthanbothEPandNa2SeO3.　　Keyselenite；Hep2；Antitumor　　0引言近年来，随着对海洋生物活性研究的不断深入，对海藻多糖抗病毒、抗肿瘤以及免疫调节作用进行了比较广泛和深入的研究。硒是人体必需的微量元素之一，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多方面的作用。近年来，含硒的生物大分子化合物的生物活性日益受到重视。有研究报道，灵芝硒化壳聚糖能够体外诱导K562细胞凋亡[1]。本实验利用亚硒酸钠与麒麟菜多糖提取物化合而成的硒化麒麟菜多糖（以下简称硒化多糖）,有效地降低了硒的毒

6、副作用，并增强了多糖的生物学功能，具有硒和多糖的双重功效。　　1材料与方法　　1.1材料　　1.1.1细胞株　　人喉上皮细胞癌Hep2细胞株。　　1.1.2麒麟菜多糖　　暨南大学化学系提取，用PBS配制成8mg/ml的原液，用0.1mol/L的NaOH调pH值为7.2，高压蒸汽消毒，置4℃冰箱备用，使用前用RPMI1640液稀释。　　1.1.3硒化麒麟菜多糖　　由暨南大学化学系合成并检测,含硒量为0.4μg/mg。用PBS配制成8mg/ml的原液，用0.1mol/L的NaOH调pH为7.2，高压蒸汽消毒，置4℃冰箱备

7、用，使用前用RPMI1640液稀释。　　1.1.4亚硒酸钠　　（Na2SeO3）国产分析纯,含量97%，相当于含硒量44.3%。用PBS配制成90μmol/L原液，置4℃冰箱备用，使用前用RPMI1640液稀释。　　1.1.5噻唑喃　　（MTT,Sigma）用pH7.2的PBS配制成5.0g/L，过滤除菌，4℃避光保存，一周内使用。　　1.1.6二甲亚枫　　（DMSO，国产分析纯）用pH7.2的PBS配制成30%体积分数备用。　　1.1.7仪器　　450型酶标仪（BIORAD）。　　1.2方法　　1.2.1细胞培养H

8、ep2细胞株接种于含10%新生牛血清（杭州四季青生物工程材料研究所,经56℃灭活30min）、青霉素、链霉素各100U/ml的RPMI1640（Gibco）培养液中,在37℃、5%CO2饱和湿度的培养箱中培养，每3d按1∶3或1∶4（积比）体传代一次。　　1.2.2MTT比色分析法测定细胞抑制率对数生长期细胞经胰蛋白酶（质量分数