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《通心络对糖尿病大鼠心肌微血管炎症损伤及血管痉挛的防治作用论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、通心络对糖尿病大鼠心肌微血管炎症损伤及血管痉挛的防治作用论文.freelicrovascularinflammatoryinjuryandvasospasminthecardiacmuscleofstreptozotocin(STZ)diabeticrats.MethodsSTZratsalcontrol.ThenormalgroupandSTZgroupinisteredinisteredusclemunohistochemicalstaining.Thelevelofadhesionmolecule-1(sICAM-1),tumornecrosis
2、factor(TNF-α),endothelin-1(ET-1),angiotensin-Ⅱ(AT-Ⅱ)inmyocardialhomogenatefromintercellular,andlevelofAT-Ⅱ,neuropeptideY(NPY)inplasmained,e-linkedimmunosorbentassayandtheothersbyradioimmunoassay.ThesectionsstainedbyNF-κBimmunohistochemicalstainingageanalyzedusingputer.Theextento
3、fitsexpressioneanofthedensityratioofthepositiveside.Resultsparedalrats,thecontentofsICAM-1,TNF-α,ET-1,AT-ⅡandtheexpressionofNF-κBinthemyocardialhomogenateofSTZratsaofSTZratsincreased(P＜0.05),butintheTongxinluogroupitaitigated.ConclusionTongxinluohadtheeffectofpreventingandcuring
4、formicrovascularinflammatoryinjuryandvasospasmincardiacmuscleofSTZrats.Keyicrovascularinflammatoryinjury；vasospasm；cardiacmuscle；diabeticrats通心络是临床治疗冠心病应用广泛的中成药之一,具有益气通络、解痉止痛等作用。我们针对微血管炎症损伤导致血管痉挛的机制,检测心肌组织核因子-κB(NF-κB)阳性表达、细胞间粘附分子-1(sICAM-1)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、内皮素-1(ET-1)、血管紧张素-Ⅱ(AT-
5、Ⅱ)及神经肽Y(NPY)等,观察通心络对其的影响。1实验材料1.1动物普通级-1ELISA试剂盒(美国RDSystemsInc,批号0704218,中国尚柏公司提供)；TNF-α、ET-1、AT-Ⅱ、NPY放射免疫试剂盒(北京普尔伟业生物科技有限公司)。免疫组化试剂：一抗：小鼠抗大鼠NF-κBp65(美国SANTACRUZBIOTECHNOLOGYINC,sc-8008,Lot：H0107)；二抗：羊抗小鼠-HRP(广谱、加强型,上海长岛生物技术有限公司),DAB显色。匀浆机(IKA-ULTRA-TURRAXT25basic)；ELx808酶标仪(美国
6、BIO-TEKINSTRUMENTS,INC)。GMJ型全自动放射免疫γ计数器(江苏省医疗电子研究所)。DDL-5冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂)。图像分析软件：HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文分析系统(同济医科大学千屏影像工程公司)。2实验方法2.1模型制备及分组-1采用酶标双抗体夹心法测定,根据酶标仪测定结果,建立sICAM-1标准曲线方程,根据曲线方程计算各样品sICAM-1含量。TNF-α、ET-1、AT-Ⅱ、NPY采用放免法测定,由仪器自动计算各样品含量。NF-κB阳性表达程度：心肌组织切片脱腊至水化,微波抗原热修复,3%过氧化氢封闭
7、内源性过氧化物酶,5%正常山羊血清封闭组织内蛋白,按照1∶150稀释一抗,染色过程均设阳性对照组和阴性对照组,阳性对照组为已知切片的阳性组织,阴性对照组为PBS代替一抗。上述切片严格按照说明书操作,结果可见阳性细胞呈棕黄色。取每一切片,在物镜为20倍的光学显微镜下,在靠近左心室内膜下随机采集5～10个光镜视野,输入到HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文分析系统,采用其分析软件,在相同的背底倍体(20倍体,像素点长0.816μm,)条件下,选择阳性细胞较多的区域,采集5个光镜视野,计算其阳性细胞占所有细胞的百分比含量(面密度)。对每个光镜视野计算阳性
8、面密度比值,计算公式为：阳性面密度比值＝阳性细胞面密度/(阳性细胞面密度＋阴性细胞面密度)。对
