注射链脲佐菌素对小鼠血液、胰腺ros及生长抑素的影响

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1、注射链脲佐菌素对小鼠血液、胰腺ROS及生长抑素的影响：沈丽珍施用晖李武代国杰郑舟怡乐国伟【摘要】目的观察注射链脲佐菌素(STZ)小鼠血糖、活性氧族(ROS)、抗氧化酶、胰岛素(INS)和生长抑素(SS)的变化，探讨ROS和SS在糖尿病(DM)发生过程中的作用。方法昆明种小鼠腹腔注射STZ枸橼酸缓冲液，分别在注射后0、1、3、6、12和24h测定血糖、INS及SS水平、ROS、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱苷肽过氧化物酶(GSHPx)活力及丙二醛(MDA)。结果全血、胰腺、肝脏ROS在注射后即开始升高

2、，分别在6h、3h和6h到达峰值。血清、胰腺SS分别在6h和3h降至最低值。血清INS水平在6h时显著高于各时间点。3h血糖水平显著高于其他各时间点，6h明显降低。血液、胰腺和肝脏GSHPx和SOD活力在注射后均显著降低，同时MDA含量则显著升高。相关性分析显示，全血、胰腺ROS和SS呈显著负相关，而全血ROS和血清INS则为显著正相关。结论STZ产生大量ROS损伤SS表达分泌，使SS对胰腺B细胞保护作用减弱，进一步损害B细胞，INS分泌异常，血糖随之改变，ROS损伤SS分泌是STZ诱导产生DM的重要

3、原因。【关键词】活性氧族;糖尿病;生长抑素;链脲佐菌素　链脲佐菌素(STZ)是从链霉素中分离出来的抗生素，由葡萄糖和甲基化氮源部分组成，结构与葡萄糖相似，能够通过葡萄糖转运载体2(GLUT2)转运进入细胞，因而对含有高水平GLUT2的胰腺B细胞更易产生毒性〔1〕。胰腺内抗氧化酶活性低，更容易受到自由基的攻击〔2〕，STZ诱发的活性氧族(ROS)在胰腺损伤中发挥着重要作用。生长抑素(SS)是一种调节性抑制肽，有广泛生物学活性，现在认为SS对许多疾病如糖尿病(DM)、肿瘤、帕金森病等的发生、发展及防治具有重

4、要意义〔3，4〕。胰岛D细胞能够分泌具有抗氧化功能的SS，能抑胰岛素(INS)分泌，进一步减少糖代谢产生的自由基。认识SS在控制自由基的水平，防止胰岛氧化损伤中的作用，将有助于认识DM发生机制，为防治DM提出新的控制与治疗手段。本研究通过腹腔注射STZ后小鼠血液、胰腺SS、ROS以及血糖水平变化，研究SS在控制ROS水平、INS、血糖以及体内抗氧化活性中的作用。　　1材料与方法　　1.1材料　　1.1.1动物清洁级昆明种小鼠，雄性，4～6周龄，体重14～19g，同室分笼正常日粮饲养，自然光照，自由采食和

5、饮水。环境温度控制在(23±2)℃，湿度60%。　　1.1.2试剂STZ(BioBasicInc公司);辣根过氧化物酶(HRP)(北京拜尔迪生物公司);鲁米诺(苏州亚科化学有限公司);邻苯三酚(AR级)(中国医药集团上海化学试剂公司);INS、SS放射免疫试剂盒(北京华英生物技术公司);MDA试剂盒(南京建成生物工程研究所)。　　1.1.3主要仪器血糖仪(美国琼森lifescan);MPIB型多参数化学发光分析测试系统(西安瑞迈分析仪器公司);低温高速离心机(上海安亭科学仪器厂);超低温冷冻冰箱(美国

6、INVETRO公司);MultiskanMk3酶标仪(美国Thermo公司);UV1100型紫外分光光度计(北京瑞利科学仪器有限公司)。　　1.2分组与模型制备昆明小鼠随机分成6组，每组10只，适应喂养1g/kg体重单次腹腔注射0.1ml新鲜配制的STZ枸橼酸缓冲液，分别在注射后0、1、3、6、12和24h摘眼球取血，置肝素抗凝管中，立即加入抑肽酶混匀，离心取上清低温保存待测。迅速取出胰腺和肝脏，制备组织匀浆液，离心取上清-20℃保存待测。　　1.3观察指标和测定方法琼森LifeScan血糖仪快速测定

7、血糖;血、胰腺INS和SS用放射免疫法由北京华英生物技术公司测定;血、胰腺和肝脏ROS采用Luminol化学发光法测定;血和组织匀浆中SOD采用邻苯三酚自氧化法测定;GSHPx采用DTNB直接法测定;MDA含量按南京建成生物工程研究所测定试剂盒说明书进行。　　1.4统计学方法采用Origin7.0软件对ROS进行积分统计，Excel对实验资料进行统计和整理，结果以x±s表示，采用SPSS17.0统计软件进行t检验。　　2结果　　2.1小鼠血液、胰腺和肝脏ROS水平注射STZ后全血ROS开始升高，于6h

8、处达到最高点，显著高于0h水平(P<0.01)，随后降低，24h内小鼠全血ROS水平呈现升高降低升高趋势。胰腺、肝脏ROS在注射后也逐渐上升，胰腺ROS水平在3h后达到最高点，显著高于0h水平(P<0.01)，之后出现降低，注射STZ24h后，ROS保持在注射前的150%。肝脏ROS水平在3h时是0h的142%(P<0.01)，并于6h达最高值，注射24h后ROS仍是注射前的158%。见表1。表1注射STZ后小鼠血液、