乌斯他丁对大鼠门静脉阻断后肠粘膜屏障影响的实验研究

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1、乌斯他丁对大鼠门静脉阻断后肠粘膜屏障影响的实验研究徐敬何建平郑南杨福邬明沈骅　【摘要】目的：探讨阻断大鼠门静脉对肠屏障功能的影响以及乌斯他丁对其损害的保护作用，为临床门静脉阻断后肠屏障功能的保护提供实验依据。方法：SD大鼠70只，随机分为对照组（n=10）、手术组（n=30）、手术+药物组（n=30）。手术组及手术+药物组门静脉阻断时间为40min，门静脉复流4h。70只动物均于手术后4h40min在无菌条件下取门静脉血2ml检测内毒素：取回盲部肠系膜淋巴结作细菌培养；距回盲部2cm处取小肠肠壁组织1cm，作病理学检查，观察肠粘膜通透性及其形态学结构改变。结果：对照组与手术组

2、比较，大鼠门静脉阻断后其门静脉血内毒素水平明显上升；肠系膜淋巴结细菌培养阳性率增加；小肠壁形态学结构亦发生明显改变。手术+药物组与手术组比较，上述指标均有改善。结论：大鼠门静脉阻断后可导致其肠屏障功能的损害，乌斯他丁对上述损害具有保护作用。【关键词】门静脉阻断・肠粘膜屏障・乌斯他丁・大鼠Effectsofulinastatinonintestinalmucosalbarrierafterocclusionofportalveininrats【ABSTRACT】Objective:Tostudytheeffectofportalveinocclusiononintestinal

3、mucosalbarrierinratsandtheprotectionofulinastatintotheinjury,topresenttheexperimentaldatafortheclinicalsurgery.Methods:70SpragueDalydividedintocontrolledgroup(n=10),operationgroup(n=30)andoperation+medicationgroup(n=30).Theportalveininintheoperationgroupsandoperation+medicationgroups.2mlblo

4、odfromportalvein,lymphnodesaroundappendix,1cmsmallintestineinationsintheallrats280minsafteroperation.Themocusalbarrierandmicroscopicstructureofintestineedicationgroup,theformerchangesisalsoobvious.Conclusion:Theocclusionofportalveincanleadsthedecreaseofintestinemocusalbarrierandtheincreaseo

5、fitspermeability.Ulinastatinhasagoodprotectiveeffectonthedamagesabove.【KEYias200型图像分析系统，日本产UA160A紫外分光光度计。主要试剂：鲎试剂、营养琼脂和营养肉汤。1.2方法1.2.1实验动物分组大鼠随机分为Ⅰ组（对照组，n=10）、Ⅱ组（手术组，PVO40min,n=30）、Ⅲ组（手术+药物组，PVO40min,n=30）。1.2.2手术方法术前禁食12h，饮水不限，3%戊巴比妥钠（30mg/kg）腹腔内注射麻醉。寻找鼠尾静脉，在无菌条件下行尾静脉穿刺建立静脉通道。大鼠取上腹部正中切口长约5

6、cm，逐层开腹。Ⅰ组：用盐水纱布将小肠推向下腹部，分离肝胃韧带及肝十二指肠韧带，钝性分离出门静脉，但不阻断门静脉，恢复小肠位置，用盐水纱布覆盖伤口，实验过程中始终保持纱布湿润，手术室温度保持在20~25℃。Ⅱ组、Ⅲ组：手术步骤同Ⅰ组，找到门静脉后均用无创血管夹阻断门静脉，阻断时间为40min，然后松开血管夹进行门静脉复流，4h后取材并处死大鼠。用药方法：手术前5min开始经尾静脉连续滴注液体，直至复流结束取完标本后停止。Ⅰ~Ⅱ组：乳酸钠林格液（10滴/min）；Ⅲ组乌斯他丁（5000U/kg，10滴/min,1250U/200ml乳酸钠林格液）。1.2.3取样Ⅰ组大鼠于手术后

7、4h40min，Ⅱ~Ⅲ组在门静脉阻断达到40min后，进行门静脉复流4h然后取以下标本，处死动物。（1）门静脉取血，所有与门静脉血接触的物品均预先通过去热源处理，直接穿刺门静脉取血2ml，置于无热源肝素液中，低温保存并在48h内完成内毒素检测；（2）取回盲部周围肠系膜淋巴结，称重0.5g，匀浆，加1ml无菌生理盐水后移入细菌培养基，充分混匀，置CO2孵箱培养48h后观察结果，同时取小肠内粪便作细菌培养。（3）于距回盲部2cm处取小肠壁1cm，用10%福尔马林液固定送检。1.2.4指标检测1.2.4.1门