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时间:2018-07-06
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1、月见草油与维生素E对衰老模型小鼠骨丢失的影响论文张益嘉吴铁崔燎苏华李响袁红江【摘要】目的观察月见草油和维生素E对D半乳糖致衰老小鼠骨丢失的预防作用,从骨代谢方面探讨其可能的机制。方法40只8周龄昆明雌性小鼠随机分为4组:青年对照组,衰老模型组,维生素E组,月见草油组,每组10只,以颈背部皮下注射半乳糖1000mg·kg-1·d-1造成亚急性衰老模型,并预防灌胃用药6roseoil(EPo)andVitaminE(VitE)onosseouschangesintheagingmiceinducedbyDgalactose(Dgal)andtheirmech
2、anismsofbonemetabolism.Methods40femaleKunmingmiceodels.Boneroutineparameterssuchasbonedry,bonemicroelementsandbonemetabolismparameterssuchasserumalkalinephosphatase(AKP)activity,serumtartrateresistantacidphosphatase(StrACP)activityongcontrol,Dgal(model),VitEandEPogroups.ResultsThe
3、bonedryAKPactivityodelgroupthanthoseincontrolgroup(P<0.05orP<0.01).TheabovechangesofVitEandEPogroupsodelgroup(P<0.05orP<0.01).VitEandEPoalsoenhancedthecontentofbonecalciumandmicroelements(P<0.05orP<0.01).HoStrACPactivity(P<0.05)paringcouldinduceagingrelatedosteopenia.EPoandVitEcould
4、improveosseouschangesinducedbyDgal.Thesechangesprobablyarerelatedtotheregulatoryeffectsoftheactivitiesofosteoblastandosteoclast.【Keyroseoil;VitaminE;Dgalactose;Aging;Bonemetabolism月见草油系由柳叶科多年生草本植物月见草种子榨取的,它含有亚油酸、油酸、棕榈酸、亚麻酸等多种人体必需不饱和脂肪酸、维生素和矿物质等。不饱和脂肪酸在骨质疏松治疗和预防中的潜力通过研究逐渐显现出来〔1〕。然而
5、富含不饱和脂肪酸的月见草油进一步深入的抗骨质疏松实验却未见报道。D半乳糖能使机体自由基积聚〔2〕,是常用的亚急性衰老模型工具药,其致大鼠、小鼠骨丢失作用亦被多次报道〔3,4〕。本研究尝试通过D半乳糖致动物衰老模型,同时以自由基清除剂维生素E为阳性对照药,观察月见草油对骨丢失的预防作用及其可能机制。1材料与方法1.1材料1.1.1药物D半乳糖,生化试剂(上海试剂厂生产,生产批号:F2006025);精制月见草油(大连浓华生物工程有限公司生产),出厂检测主要含γ亚麻酸9.2%、亚油酸74.1%、维生素E0.093mg/g;维生素E油剂(广东医学院医药科技开
6、发中心提供)。1.1.2试剂羟脯氨酸测试盒、碱性磷酸酶(AKP)活性测试盒、抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)活性测试盒(均购自南京建成生物工程公司);其余试剂均为市售分析纯。1.1.3仪器与设备ELX800型酶标仪(美国BIOTek公司);ASD.3D爱华电子秤(深圳市爱华仪器有限公司);AE240型电子分析天平(MettlerToledo仪器有限公司);IRIS/AP电感偶合等离子体发射光谱仪(ICP仪,美国TJA公司)1.1.4实验动物昆明种8周龄清洁级雌性小鼠40只,体重(26.09±2.21)g,由广东医学院实验动物中心提供,北京产大鼠维持期全
7、价饲料饲养,自由摄食、摄水。1.2方法1.2.1分组与给药40只小鼠随机分为:青年对照组,衰老模型组、维生素E组、月见草油组,每组10只。青年对照组每日颈背部皮下注射生理盐水,后3组分别皮下注射半乳糖1000mg·kg-1·d-1造模,维生素E组再灌服维生素E250mg·kg-1·d-1;月见草油组再灌服月见草油5ml·kg-1·d-1,连续6lHNO3消化骨组织,置108℃恒温干燥箱24h后取出消化液过滤备测;按羟脯氨酸测试盒方法测定骨羟脯氨酸含量,根据骨有机质中骨胶原占90%以上,骨胶原中羟脯氨酸含量比较稳定,约占12.5%,因此以骨羟脯氨酸含量/(0.9
8、×0.125)计算骨有机质相对含量;I
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