《食品中L-赖氨酸的测定—酶电极法》行业标准征求意见稿

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1、ICS点击此处添加中国标准文献分类号中华人民共和国行业标准XX/TXXXXX—XXXX食品中L-赖氨酸的测定—酶电极法DeterminationofL-lysineinfood—Enzyme-electrodemethod点击此处添加与国际标准一致性程度的标识(工作组讨论稿)(本稿完成日期:)XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施发布/TXXXXX—XXXX前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由全国食品工业标准化技术委员会提出并归口。本标准起草单位:菱花集团有限公司、山东寿光巨能金玉米开发有限公司、武汉

2、远大宏元股份有限公司、天津科技大学、山东省科学院生物研究所、中国生物发酵产业协会。本标准主要起草人:xxx、I/TXXXXX—XXXX食品中L-赖氨酸的测定-酶电极法1范围本标准规定了酶-电极法测定各类食品中L-赖氨酸的分析步骤。本标准适用于各类食品中L-赖氨酸的测定,亦适用于食品中其他组分转化为L-赖氨酸的测定。本标准的最低检出限量为10.0mg/L。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T668

3、2分析实验室用水规格和试验方法3方法提要赖氨酸氧化酶在有氧条件下催化L-赖氨酸(赖氨酸水溶液状态)氧化,生成过氧化氢和其他产物,过氧化氢与过氧化氢型电极接触产生电流,该电流值与L-赖氨酸的浓度呈线性比例,在酶电极L-赖氨酸分析仪上直接显示L-赖氨酸含量。4试剂和溶液本试验方法中,所用试剂除特殊注明外均为分析纯;用水应符合GB/T6682中三级(含三级)以上的水规格。4.1组合试剂盒4.1.1L-赖氨酸氧化酶酶膜圈含有赖氨酸氧化酶0.1U(活力单位);应在0℃~4℃左右保存,有效期12个月。4.1.2复合试剂含磷酸二氢钾12%、磷酸氢二钾

4、54.73%、乙二胺四乙酸二钠4.4%、氯化钠21.55%、苯甲酸钠7.31%、庆大霉素硫酸盐0.059%;常温保存,有效期24个月。4.1.3L-赖氨酸标准溶液浓度1000.0mg/L;密封保存,有效期12个月。4.2缓冲溶液将15g复合试剂(4.1.2)溶解在500mL蒸馏水中,摇匀。pH=7.2±0.1。1/TXXXXX—XXXX5仪器和设备实验室常用和下列仪器适用于本标准5.1研钵或粉碎机5.2组织捣碎机5.3分析筛5.4酶电极赖氨酸分析仪直接读数式,测量范围0.0mg/L~1000.0mg/L(L-赖氨酸);测量精度±10.0

5、mg/L(L-赖氨酸)。5.5微量进样器:容量50μL,精度1μL。6试样的制备6.1固体试样取有代表性的样品至少200g,用研钵、粉碎机或者组织捣碎机制成粉末,通过100目分析筛,充分混匀,置于密闭容器内。6.2液体试样取有代表性的样品至少200mL,充分混匀,置于密闭的玻璃容器内。6.3固液两相试样取有代表性的样品至少200g,用研钵、粉碎机或者组织捣碎机制成粉末,充分混匀,置于密闭容器内。6.4糊状试样取有代表性的样品至少200mL,充分混匀,置于密闭的玻璃容器内。7试液的制备7.1固体试样和固液体试样称取试样1g~10g于100

6、mL烧杯内,精确至0.0001g,用蒸馏水移入100mL容量瓶中,稀释至刻度,摇匀,放置30min(摇动2~3次),用快速滤纸或脱脂棉过滤。弃去最初滤液,收集1mL~2mL滤液于带盖小试管中。注:定容后L-赖氨酸含量为10mg/L~1000mg/L,如果试液中L-赖氨酸含量大于1000mg/L时,应适当增加定容体积。7.2液体试样和糊状试样2/TXXXXX—XXXX吸取试样1mL~10mL于100mL烧杯内,精确至0.0001mL,用蒸馏水移入100mL容量瓶中,稀释至刻度,摇匀。然后吸取1~2mL稀释液于带盖小试管中。注:定容后L-赖

7、氨酸含量为10mg/L~1000mg/L,如果试液中L-赖氨酸含量大于1000mg/L时,应适当增加定容体积。8分析步骤8.1校正仪器按下仪器“排空换膜键”(菜单→排空换膜→排空)将反应池内液体排空,取出电极,将其表面清理干净,吸取缓冲溶液(3.2)滴在电极表面。用小镊子取一片酶膜圈,安装在电极表面,使酶膜圈中心和电极中心的白金完全贴紧,形成无气泡的薄层液体,然后将电极安装在反应池内,选择对应的电极,按一下“输入”键。仪器运行后,缓冲溶液即自动加入反应池,并自行冲洗。当仪器出现“定标,请进标样”指令后,用微量进样器准确吸取25μL标准准

8、液(4.1.3),用滤纸擦净针尖外部,将标准溶液注入进样口内。20-40s后仪器自动显示标准溶液的指示值,然后仪器自动完成冲洗过程。当仪器再一次出现“定标,请进标样”指令后,即可注入25μL标准溶液(4.1

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