《食品中L-赖氨酸的测定—酶电极法》行业标准编制说明征求意见稿

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1、《食品中L-赖氨酸的测定—酶电极法》行业标准编制说明(征求意见稿)一、工作简况1、任务来源本项目是根据工业和信息化部办公厅关于印发2015年第四批行业标制修订计划的通知（工信厅科[2015]165号文），计划编号2015-1746T-QB，项目名称为“食品中L-赖氨酸的测定酶电极法”进行制定。主要起草单位：中国生物发酵产业协会和山东省科学院生物研究所等，计划应完成时间2018年。2、主要工作过程（1）起草（草案、论证）阶段：2015年11月工信部标准制修订计划下达后，中国生物发酵产业协会于2016年5月19日召开了标准启动工作会议，和有关起草单位一同

2、针对制定《食品中L-赖氨酸的测定—酶电极法》行业标准的具体工作进行了认真研究，确定了总体工作方案，并组建了标准起草工作小组。中国生物发酵产业协会牵头组织该标准的制定工作，山东省科学院生物研究所作为主起草单位，负责起草标准文本草稿（第一稿）。起草成员单位吸纳了国内研究所、高校及主要生产企业，能代表全国的情况。之后，起草工作组对国内外标准及有关技术资料进行检索整理，并向使用单位广泛征求制定标准的意见，结合国内实际情况，对现有检测方法利弊等进行综合分析后，经过对标准的框架结构、适用范围、新的规定要求等进行充分研究，初步确定了检测方法的技术指标和操作规程，2

3、016年8月，由起草工作组提出了《食品中L-赖氨酸的测定—酶电极法》初稿及编制说明。2016年10月，起草小组召开了第二次起草工作组会议（微信网络会议），会上对方法的配套试剂、操作流程及评价方法等内容进行了深入、细致的讨论，会后，起草工作组对标准文本及编制说明进行了修改，组织样品检测，根据结果情况做进一步完善。2017年03月，在前一段的工作基础上，由起草工作组提出标准草案征求意见稿和编制说明，发至各个生产厂和相关单位征求意见。（2）征求意见阶段：2016年5月开始，通过邮件、信件的形式向全行业公开征求意见。2017年1月开始，对意见进行汇总。3、主

4、要参加单位和工作组成员及其所做的工作等本标准由菱花集团有限公司、山东寿光金玉米开发有限公司、武汉远大宏元股份有限公司、天津科技大学、山东省科学院生物研究所、中国生物发酵产业协会负责起草。主要成员：暂略。所做的工作：负责行业调研，相关标准的研究，样品检测、数据对比整理，标准文本及其编制说明的编制等。二、标准编制原则1、按照GB/T1.1-2009《标准化工作导则第一部分：标准的结构和编写规则》的要求和规定编写本标准内容；2、符合国家相关的政策法规；3、积极接轨国外最新标准要求；4、有利于推动行业技术进步；5、有利于提高经济效益；6、符合用户要求。三、标

5、准编制的说明1、标准名称本标准的名称为《食品中L-赖氨酸的测定—酶电极法》。2、方法设计理念的说明L-赖氨酸是鉴定食品品质和发酵过程控制的一项重要指标。赖氨酸的测定方法主要有：滴定法、分光光度法、氨基酸自动分析仪法、液相色谱法、酶电极法。但传统的化学法测定L-赖氨酸都有一定的局限性，如分光光度法是赖氨酸溶液与茚三酮试剂反应的特殊显色产物的光吸收(OD)值来计算浓度，样品中影响因素很多、特异性差，不能有效测定L-赖氨酸。从目前的资料看，已建立的L-赖氨酸测定方法是液相色谱法（HPLC），但样品颜色、浊度等都有影响，样品需要复杂的前处理。酶电极(Enzy

6、meElectrode)是生物传感器的一种类型。上世纪60年起，随着固定化酶技术的发展，与离子选择性电极组合，逐步形成了稳定的酶电极分析系统，在分析检测领域引起广泛的关注。酶电极法是将具有专一性的生物催化剂酶蛋白分子固定化，然后与电化学传感器结合构成酶电极分析技术，在L-赖氨酸存在时，赖氨酸氧化酶以L-赖氨酸及分子氧为底物，生成相应的氧化产物及过氧化氢（H2O2），所生成的过氧化氢被铂基底电极以电流的形式所感测并且其浓度同L-赖氨酸的浓度在一定范围内成正比，该方法专一性强、准确性高、测定成本低、分析速度快，对样品要求少，可带细胞测定。其中，SBAL-

7、赖氨酸酶电极已在我国食品、发酵领域应用多年，技术成熟度高，应用效果良好可以看出，已证明是一种技术先进、方法可行测定方法。3、解决的主要问题采用酶电极法解决食品中L-赖氨酸的测定问题。在有机膜载体上将L-赖氨酸氧化酶（L-lysineoxidase）固定化，与过氧化氢电化学电极组合，形成酶电极。酶电极在反应池内与相应的试剂发生催化反应，产生电流信号，该电流值与样品中L-赖氨酸的浓度呈线性比例，在酶电极分析仪上直接显示相关化合物的含量。整个测定过程由自动化仪表控制完成。建立基于该方法的相关分析标准，对提高我国分析方法标准化技术水平，加快行业的科技进步具有

8、重要的意义。4、样品的处理（1）试样的制备○1固体试样取有代表性的样品至少200g，用研钵、粉碎机或者组织捣