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时间:2018-06-12
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1、文冠木喷雾剂中总黄酮含量测定摘要:目的建立文冠木喷雾剂中总黄酮的含量测定方法。方法采用紫外分光光度法,通过紫外可见扫描确定最大吸收波长,以芦丁为对照品制定标准曲线,并进行样品溶液稳定性实验和方法回收率与重复性实验。结果最大吸收波长为500nm,标准曲线线性范围为10.520mg/L~63.120mg/L,r=0.9997。平均回收率为95.09%,RSD=1.61%,符合要求。结论该方法简单方便、准确可靠,可以用来进行文冠木喷雾剂中总黄酮的含量测定。关键词:文冠木;总黄酮;紫外分光光度法Abstract:ObjectiveToestab
2、lishamethodfordeterminationoftotalflavonoidsinXanthocerassorbifoliaspray.MethodsUsingUVspectrophotometry,UVVisscantodeterminethemaximumabsorptionwavelength,withrutinasastandardtomakethestandardcurve,andthesamplesolutionstabilityexperimentandrecoveryrateandrepeatability.R
3、esultsThemaximumabsorptionwavelengthis500nm,thelinearrangeofstandardcurveis10.520~63.120mg/L,r=0.9997.Theaveragerecoverywas95.09%,RSD=1.61%,meetthe6requirements.ConclusionThemethodissimple,accurateandreliable,canbeusedforthedeterminationofcontentoftotalflavonoidsinXantho
4、cerassorbifoliaspray.Keywords:XanthocerassorbifoliaBunge;Totalflavonoids;UVSpectrophotometry文冠木处方由三类药物构成,即文冠木、黄连和人工牛黄。文冠木为无患子科植物文冠木(XantHocerasSorbifoliaBge.)的茎干或枝条的无皮干燥木部,是一种常用的蒙药材。主要用于治疗风湿性关节炎、风湿内热、皮肤风湿、风湿性心脏病等病症[1],其中有效成分为总黄酮。黄连[2]为毛莨科植物黄连,三角叶黄连或云南黄连的干燥根茎。黄连的药用始载于《神农本
5、草经》,列为上品,能清热燥湿,泻火解毒,现代研究表明黄连的有效成份主要为小檗碱(即黄连素Berberine),含量可达10%左右。人工牛黄[3]由胆酸、猪去氧胆酸、胆红素、胆固醇等配制而成,具有清心、豁痰、开窍、凉肝、息风、解毒等功能。由于该处方药中文冠木质量占有绝大部分,故对其文冠木中的总黄酮进行含量测定,为其进一步开发研究奠定基础。1仪器及试剂6紫外-可见分光光度仪:岛津UV-2401PC型(日本);离心机:飞鸽牌LXJ-ⅡB型低速大容量多管离心机;超声波清洗仪:KQ2200B型(昆仑超声仪器有限公司);分析天平:ESJ200-4型
6、(沈阳龙腾电子有限公司)。芦丁对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号:0080-9705);其它试剂试药均为分析纯。样品来源:文冠木(内蒙古库伦旗蒙药股份有限公司),黄连(重庆石柱黄连有限公司),人工牛黄(内蒙古自治区海拉尔生物化学制药厂)。2方法学考察与结果2.1测定方法及波长的选择根据文献报道[4,5],文冠木中的黄酮类化合物的3,5羟基与Al3+生成络合物,在可见光区有最大吸收的特点,故选用芦丁作为对照品,采用紫外分光光度法进行含量测定。分别取芦丁对照品和文冠木醇提取溶液在400~800nm波长范围内进行光谱扫描,从光谱图中可见
7、上述两种溶液在波长500nm附近有明显吸收,故选择500nm为测定波长。2.2对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品13.15mg置5ml容量瓶中,加无水乙醇稀释至刻度,摇匀,即得每1ml含2.63mg芦丁对照品。2.7重复性实验6用加液枪取出同一供试品五份,每份250μL分别注入到25ml容量瓶中,在每一容量瓶中依次加入30%乙醇12.25ml,再分别加入5%亚硝酸钠溶液1.0ml,轻摇后放置6min,再加入10%硝酸铝溶液1.0ml轻摇后放置6min,再加入1mol/LNaoH溶液10.0ml,用30%乙醇定容置25.0ml,充分摇匀后
8、放置15min。时间到后,将每一份放入离心管中进行离心操作,使转数达到4400r/min,并保持5min。离心后取出上清液进行测量,实验数据见表4。结果表明:供试品溶液的平均浓度为14.652mg/L,,R
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