bbe荧光法藻类检测原理

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1、Bbe荧光法藻类检测原理Bbe是全球著名的藻类分类检测设备供应商，该公司生产一系列藻类分类检测设备：包括在线仪器、实验室用仪器、野外用仪器。所有这些仪器采用同样的技术，只是设备的外观构造和功能组合不同。这里系统介绍通用的检测原理，然后，分别介绍不同设备的功能组合。一、藻类的荧光反应特性荧光法测藻就是利用藻类的荧光特性进行分类定量分析。所以先介绍藻类的荧光特性和bbe采用的激励光。藻类在受到外来光刺激时，将刺激光的能量转化为光合作用能量、荧光和发热，其中荧光很容易检测到的。所谓荧光，就是无论外激励

2、光的波长是多少，藻吸收后将其转化成一特定波长的光（685纳米）。研究发现两个特性：一是同一种藻受到不同波长单位强度激励光激励时，发出的荧光强度不同；二是不同的藻在受到相同波长单位强度激励光激励时，发出的荧光强度也不同。Bbe选择了325纳米、450纳米、525纳米、570纳米、590纳米和610纳米六种不同波长的激励光对被测对象进行刺激。其中325纳米是用来补偿黄色物质（有机物）的，另外几个波长就是为了定量分析不同藻类的。Bbe所采用的激励光：强度都是1，波长不同。不同的藻类其叶绿素-a的荧光特

3、性不同，如果我们准备单位浓度的蓝藻叶绿素-a，用以上不同的激励光激励，得到一组数据，这组数据就是蓝藻叶绿素的特征；换成单位浓度的绿藻叶绿素-a，同样用这组光激励，得到绿藻的特征值。实验证明，每种藻的叶绿素-a有其特有的荧光特性。这些荧光特性，可以用来定量分析不同的藻产生的叶绿素-a的浓度。经销商：杭州求是电子有限公司地址：浙江省临安市锦城街道保锦路106号电话：0571-63711688传真：0571-63715813第5页共5页不同类的藻产生的单位浓度的叶绿素-a的荧光特征曲线二、分类检测叶绿

4、素-a的浓度根据以上藻的荧光特性，可以检测出不同类的藻贡献的叶绿素-a的浓度。一个水样中的叶绿素-a有多少是蓝藻贡献的、多少是绿藻贡献的、多少是硅甲藻贡献的、多少是隐藻贡献的。检测到不同的藻类贡献的叶绿素-a的浓度，就可以估计藻的浓度。分类检测叶绿素-a的浓度还基于以下事实：一是在激励光一定的情况下，任何一种藻产生的荧光强度与其所含的叶绿素-a的浓度成正比；二是在激励光一定的情况下，几种不同的藻混合体产生的荧光强度等于这几种同样浓度叶绿素-a的样品产生的荧光强度的总和。如果用m表示藻的种类，n表

5、示激励光的编号，Fmn表示在n激励光作用下m类藻贡献的叶绿素产生的荧光强度，Fn表示在激励光n的作用下所有叶绿素-a产生的总荧光强度，Cm表示m类藻贡献的叶绿素-a的浓度，则：Fmn=Km,nXCm（1）其中Km,n是只依赖于m和n的常数，当藻的种类和激励光确定后，该值不变。Fn=Km1,nXCm1+Km2,nXCm2+Km3,nXCm3+...+Kmt,nXCmt(2)有了以上原理，我们事先可以通过实验研究，确定所有的Km,n值，也就是（2）中的所有K值是可以事先取得，并存储于检测设备内部的。

6、对于一个被测样本，Fn是可以通过设备上自带的光度计直接检测到的，Cm1,Cm2,...经销商：杭州求是电子有限公司地址：浙江省临安市锦城街道保锦路106号电话：0571-63711688传真：0571-63715813第5页共5页Cmt是我们需要检测的浓度。显然，对于一个激励光，用（2）式可以得到一个线性方程，我们有5个激励光，就可以得到5个线性方程组成线性方程组，可以解出5种浓度。研究还发现，藻类按照其荧光特性，恰可以分为4大类。如果细分还可以分成更多的小类，但该仪器最多只支持到8类。这个方法

7、首先检测的是不同的藻贡献的叶绿素的浓度。三、分类检测藻的浓度分类检测到不同藻贡献的叶绿素浓度后，再根据历史上大量的经验数据，确定平均每个蓝藻贡献多少叶绿素-a，每个绿藻平均贡献多少叶绿素-a，等等。有了这些数据，就可以估算被测样本中不同藻的浓度。四、藻的活性检测同样采用荧光法可以检测到藻的活性，检测原理如下：弱激励光藻类热能(温度上升)光合作用消耗能荧光F0强背景光+弱激励光藻类热能(温度上升)光合作用消耗能背景荧光+Fm在暗室环境下，当很弱的激励光照到藻上时，藻类将能量分解为三部分，一部分用来

8、进行光合作用，一部分转化为荧光，一部分产生热量。显然，如果藻的活性强，光合作用消耗的能量就越多，产生的荧光的强度就越小；反之经销商：杭州求是电子有限公司地址：浙江省临安市锦城街道保锦路106号电话：0571-63711688传真：0571-63715813第5页共5页，如果藻的活性弱，光合作用就比较弱，消耗能量少，用来产生荧光的能量就大，荧光强度就强。所以可以通过荧光强度判断藻的活性。具体实现如下：实验一是先在暗室环境下，用很弱的激励光照到藻上，检测到荧光强度F0。这个值是在该弱激励光照射下，细