骨髓间充质干细胞促进骨

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1、骨髓间充质干细胞促进骨【摘要】观察骨髓间充质干细胞对骨-肌腱结合部愈合的影响。［方法］采用骨髓穿刺、全骨髓培养法获取兔骨髓间充质干细胞。36只18周龄新西兰大白兔随机分为2组，实验组将骨髓间充质干细胞与PluronicF-127载体材料结合后，植入兔髌骨部分切除模型，对照组只进行手术，不植入细胞。在术后6、12、18周进行X线片、大体和组织学观察评估。［结果］X线片显示术后6、12、18周实验组骨-肌腱结合部新生骨面积显著大于对照组(P<0.01)。大体观察可见实验组骨-腱结合部愈合较早。HE染色显示实验组术后6周有大量的纤维母细胞和类软骨细胞增生，并可见

2、新骨形成；12周，髌腱与松质骨接触面软骨细胞移行带形成；18周，纤维软骨移行带排列更有序。Safranin0染色显示实验组术后6周，基质染色较深，部分骨-腱结合处可见相对浓染区；12周，基质染色范围明显减少，沿类软骨细胞走行分布；18周，类软骨细胞集中的区域染色较12周有所减退。组织学检查显示实验组术后6、12、18周骨-腱结合部组织愈合明显，较对照组迅速。［结论］骨髓间充质干细胞可以促进骨-肌腱结合部细胞增生，促进其早期愈合。【关键词】骨髓间充质干细胞骨-肌腱结合部愈合　Abstract：［Objective］ToevaluatethoeffectsofBon

3、eMesenchymalStemCells(BMSCs)onhealingofbonetendonjunctioninapatellartendonplex.［Method］TheBMSCsofrabbitsarroarroyentalgroupeasurementsshooreneedboneatthepatellartendonpatellarhealingjunctionintheexperimentalgroupparedentalgroupenshoentalgroupconsiderablefibroblastandchondrocytelik

4、ecellularproliferation,needatedattrabecularbonepatellartendonjunctionatenshoentalgroupmatrixedbonetopatellartendonjunction,partiallythickatatrixstainsreducedanddistributedalongchondrocytelikecellsatofchondrocytelikecellsconcentrationoreimprovedtissueintegrationintheexperimentalgro

5、upatesenchymalstemcells;bonetendonjunction;healing多种原因导致的肌腱止点的损伤，如肩袖损伤、网球肘、部分撕脱型跟腱断裂等发病率逐年增高。骨-肌腱结合部愈合过程比较复杂，该部位的特征性结构纤维软骨带的再生十分缓慢和困难［1］。骨髓间充质干细胞(bonemesenchymalstemcells，BMSCs)是多种间充质细胞的前体细胞，有多向分化潜能，传代繁殖能力强，生物相容性好等优点。本研究将骨髓间充质干细胞移植入兔髌骨部分切除模型中［2］，通过X线片、大体和组织学研究，观察其在骨-肌腱结合部修复中的作用。1材料与

6、方法1.1兔BMSCs体外分离，培养与扩增8周龄新西兰大白兔，无菌条件下抽取股骨干骺端骨髓3ml，100目钢网过滤，1200r/min离心10min，采用全骨髓培养法以（6～8）×104／cm2置于75ml培养瓶培养，每瓶含10ml培养液(含青、链霉素各100U／ml，体积分数为20%胎牛血清，αMEM)，37℃、5%CO2孵箱中原代培养。4d后半量换液，以后每48～72h全量换液。当细胞融合达80％时，0.25％胰蛋白酶消化，以5×104／cm2接种到培养瓶传代，收集第3代细胞供移植用。1.2BMSCs移植修复骨-肌腱结合部(bonetendonjunct

7、ion，BTJ)损伤1.2.1实验动物及分组36只18周龄新西兰大白兔，体重2.2～2.5kg，随机分为实验组(BMSCs+载体PluronicF-127)和对照组(只手术，不植入BMSCs和载体)，分6、12、18周3个时间点，每个时间点6只。1.2.2兔髌骨部分切除手术［2］麻醉下左下肢膝外侧入路，于髌骨远端1／3横行截骨，去除远端1／3髌骨，垂直近侧剩余髌骨钻2个0.8mm的孔。髌韧带用不可吸收缝线缝合于近端髌骨上，实验组将BMSCs+载体复合物植入髌骨与髌腱之间，8字钢丝保护，膝关节石膏固定于屈膝90°位。6周后拆除石膏，笼内自由活动。在术后6、12、1

8、8周取材，分别作大体解剖