血管生成及其成熟度在肝细胞癌边缘与中心的差异研究

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1、血管生成及其成熟度在肝细胞癌边缘与中心的差异研究作者:于德新 张宗利 马祥兴 张晓明 李传福【摘要】目的:探讨肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)边缘和中心血管生成及其成熟度的差异。方法:利用免疫组织化学技术检测病灶边缘(A组)和中心区域组织(B组)血管内皮生长因子(vascularendothelialgroaturationbeta(HCC).Methods:Thirty-onecasesprovedsurgicallyandpathologicallythetumorperiph

2、eryandcenter.ContinuousslicesmunohistochemistryoffiveantibodiesagainstVEGF,Flk-1,PA.TheexpressionsofVEGF,Flk-1,andPA,andsomevascularparametersber,meanarea,totalarea,circumference,diameter,distancebeticrovesselandmaturevessels.Thearterioles,vEinlets,maturevesse

3、lindexandmeanperfusedfraction(mPF)etersabovebetber,diameter,andvarietyindexofmicrovessel,thenumberandtotalareaofmaturevessel,thearteriolesandtheratioofarterioleorvEInlet,maturevesselindexandmPFor(P<0.05).Intumorperiphery,ber,meanarea,totalarea,diameter,vari

4、etyindexandDAVbeticrovsselandmaturevessel(P<0.05),andsober,totalarea,varietyindexandDAVbeticrovsselandmaturevesselinthetumorcenter(P<0.05).Conclusion:Therearedifferencesinsomevascularcharacteristicsofmicrovesselandmaturevessel,andtheinfantvesselsoftenocc

5、urinthetumorcenter,aturevesselinperiphery.  【KEYA、CD34和PA单克隆抗体、PV9000二步法免疫组织化学检测试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司产品;捷达(JD801)形态学图像分析系统由捷达科技有限公司生产。  1.4 结果判定  1.4.1 VEGF、Flk-1及PA结果判断 VEGF、Flk-1阳性染色是在细胞质或细胞膜出现棕黄色颗粒。在400倍视野下随机选取5个视野计算阳性细胞率。根据阳性细胞率进行评分:无阳性细胞为0分,阳性细胞率<30%为1分

6、,30%~70%为2分,>70%为3分;按染色强度将其分为4个等级:无着色者0分,阳性细胞为浅黄色1分,黄色2分,棕黄色3分。将两个分值相乘,得分0~3者为阴性,≥4分者为阳性表达。PA主要在细胞核中表达,PA指数(PAindex,PI)=PA染色阳性细胞数/肿瘤细胞数×100%。  1.4.2 CD34和α-SMA结果判断 CD34和α-SMA阳性染色分别为内皮细胞质和血管平滑肌细胞出现棕黄色颗粒,CD34染色阳性血管为微血管,α-SMA阳性血管为成熟血管。利用图像分析系统对无苏木精复染的阳性血管进行自动分

7、析,根据A阳性厚度/成熟血管最小外径)来区分动脉和静脉,凡最小外径比>1/10为动脉,否则为静脉[10]。计算动脉数、静脉数、动脉比(动脉数/成熟血管数)、静脉比(静脉数/成熟血管数)以及血管成熟指数(成熟血管数/微血管密度)和平均灌注分数(成熟血管总面积/CD34阳性血管总面积)。  1.5 统计学处理 采用SPSS11.5软件包进行数据处理,计量资料采用t检验,P≤0.05为差异有统计学意义。  2 结果  本组病例共31个病灶,大体病理显示病灶直径3.0~11.0cm,平均直径为(5.64±2.24)c

8、m,直径<5cm的病灶占58.06%(18/31)。同时合并肝硬化的病灶54.84%(17/31)。病理分级高、中和低分化的肿瘤分别占12.9%(4/31)、41.94%(13/31)和45.16%(14/31)。  2.1 两组HCC各血管参数的差异 对于微血管而言,两组的微血管数目、直径及异型指数差异均有统计学意义(P<0.05,表1,图1)

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