露兜竻蔃对四氯化碳致小鼠急性肝损伤保护作用的研究

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1、露兜労藤对四氯化碳致小鼠急性肝损伤保护作用的研究黎为能，赖术，肖刚，韦健全，罗莹，廖长秀（右江民族医学院，广丙百色533000）:R285.5:A木文基金项目：广丙教育厅科研项目（桂教科研［2008］27号，项目编号：200810LX379）.［］目的：研究露兜労強水提物对实验性肝损伤模型的保护作用及其急性毒性。方法：采用四氯化碳引发小鼠的急性肝损伤模型，观察露兜労強水提物不同剂量组对血清ALT、AST活性和肝组织中MDA含量以及SOD活性的影响。同时用最大耐受量法检测露兜労強水提物对小鼠的急性毒性。结果：露兜労強水提物对小鼠最大耐受量为240g生药/Kg,能明显降低四氯化碳所致急

2、性肝损伤模型小鼠血清中的ALT、AST活性（P<0.01）,亦能明显降低肝组织中MDA含量，增加SOD的活性（P<0.01）。结论：露兜労強水提物毒性很低，属无毒级。对实验性肝损伤模型有一定的保护作用，其机制可能与抗脂质过氧化有关。［关键词］露兜労藤；急性毒性；四氯化碳；肝损伤；小鼠露兜労強［1】为露兜树科植物露兜树PandanustectoriusSoland.的根及根头，乂名勒角藤（《岭南草药志》），露兜根（《云南思茅中草药选》），生于海边地区。主要分布于广丙龙州、南宁、容县、桂平，广东、云南等地亦有分布。据广州部队《常用中草药手册》记载：“性味甘淡，凉。具有发汗解热，利水化湿

3、。主治感冒发热，肾炎水肿，尿路感染，肝炎等。”己知化学成分含大黄素甲醚、中国蓟醇、棕榈酸、硬脂酸、三•!•烷醇-1、β损固醇、豆固醇、菜油固醇、胡萝卜固醇及胡萝卜固醇、豆固醇葡萄糖式和菜油固醇葡萄糖式的混合物。另据报道［2］,乂含豆固-4-稀-3-酮，豆固-4-焼-3，6-二酮。桂平民间有人用其治疗肝炎，特别是黄疽型肝炎，疗效显著。木文对露兜労賴水提物急性毒性实验进行了研宄，并采用四氯化碳（CCI4）造成小鼠实验性肝损伤，来探讨露兜労藤水提物对肝组织的保护作用，为其临床应用提供理论依据。1材料1.1动物健康昆明小鼠60只，雌雄各半，体质量20±2g，清洁级，

4、由各江民族医学院实验动物中心提供［许可证号：SYXK桂2011-0010］。1.2药物露兜労蕷（采集于百色市阳圩）；丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）试剂盒（批号20130323,20130320）,超氧化物歧化酶（SOD）测试盒（批号20130608）,丙二醛（MDA）测试盒（批号20130314）和考马斯亮兰蛋白测定试剂盒（批号20130321），均购自南京建成生物工程研究所。联苯双酯，为北京协和药厂产品，批号1301016。四氯化碳（CCI4）分析纯，成都市科龙化工试剂厂产品，批号20090926，实验吋用花生汕配成0.1%CCI4溶液。1.3主要仪器FA200

5、4N电子天平（上海民桥精密科学仪器冇限公司）；FSH-2A可调高速电动匀浆机（金坛市金南仪器厂）；XW-80A型旋涡混匀器（上海医科大学仪器厂）；TD24A-WS低速台式离心机；722型可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）。2方法2.1露兜労藤水提取物的制备将露兜労藤粉碎成粗粉，按料液比1:10加水浸泡15min，加热煎煮两次,每次lh,过滤后合并两次滤液，浓缩溶液得水提取物，于4°C冰箱保存备用。2.2对小鼠急性毒性的实验研究根据前期预实验，因其毒性较低，无法测出其LD50,故改做小鼠试验最大耐受量（MTD）的测定。取小鼠40只，雌雄各半，禁食不禁水，12h后试验组小鼠以露

6、兜労蕷水提取物最大浓度3g/ml、最大体积0.4ml/10g灌胃，间隔6h给药1次，共2次，空白对照组给予等体积生理盐水。给药后让小鼠自由摄食及饮水,并观察小鼠的活动、行为、呼吸、皮毛、二便、进食、饮水、体蚕、鼻、眼、口腔有无异常分泌物等情况，每天上、下午各观察1次，连续7d。给药后第8天处死小鼠，观察内脏器官的变化情况。2.3对CCI4致小鼠肝损伤的影响[3-4]取昆明种小鼠60只，雌雄各半，随机分为6组，每组10只，分别为空白组、模型组、联苯双酯组、露兜労蒴水提物高剂量组、中剂量组、低剂量组（分别相当于生药12g/Kg、6g/Kg、3g/Kg）。空白组和模型组给予等体积生理盐水

7、，其余各组给予相应药物灌胃，0.1ml/10g，1次/d,连续7d，末次给药后禁食不禁水，4h后除空白对照组给予等剂量的花生油外以外，其余各组均腹腔注射（ip）0.1%CCI4花生油溶液0.1ml/10g，16h后眼球取血，分离血清，测定ALT、AST的活性。同吋小鼠颈椎脱臼处死，迅速剖取肝脏，称取肝湿重，制备10%肝匀浆,离心后取上清液，检测肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）的活性和丙二醛（MDA）的水平。2.4数据处理所有实验数据以均数&plusmri;标准差表示，