两种检测方法对宫颈病变诊断价值的对比研究

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1、两种检测方法对宫颈病变诊断价值的对比研究(汕头大学医学院第一附属医院广东汕头515031)【】目的：探讨高危HPVE6/E7mRNA对宫颈病变的临床诊断价值。方法：根据病理诊断结果的不同分为两组，其中低级别宫颈病变组(慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤变(CIN)I级)患者共70例为对照组，高级别宫颈病变(包括CINII级、CIN1II级及宫颈浸润癌)井78例患者为实验组，分别对上述宫颈细胞标木进行HPVDNA分型检测和高危HPVE6/E7mRNA检测。结果：低级別宫颈病变组中高危HPVDNA的检出率(3

2、5.7%)明显高于高危HPVE6/E7mRNA(14.2%),高级别宫颈病变组中高危HPVE6/E7mRNA的检出率(79.5%)明显低于高危HPVDNA(85.7%)，差异有统计学意义(P<0.05);高危HPVE6/E7mRNA检测的特异性、阳性预测值、阴性预测值(85.8%、86.1%、83.5%)均高于HPVDNA分型检测(64.3%、70.5%、71.4%),差异有统计学意义(P<0.05)o结论：高危HPVE6/E7mRNA检测在临床诊断过程中大大降低过度检查和治疗的机会

3、，避免了高频率和重复感染给患者带来的经济负担和精神压力。【关键词】人乳头瘤状病毒HPV;HPVDNA检测;HPVE6/E7检测;宫颈癌;方法对比【】R730.4【】A【】1007-8231(2016)14-0045-03宫颈癌是指发生于宫颈阴道部或移行带的鱗状上皮细胞及宫颈管内膜的柱状上皮细胞交界处的恶性肿瘤。世界卫生组织相关统计信息结果显示，乳腺癌和宫颈癌是威胁女性健康的两大疾病，宫颈癌的发生率已跃居我国女性恶性肿瘤的首位，发病趋势呈现年轻化，且发生率逐年上升［1］。对宫颈癌的病因学研究结果发

4、现人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)是影响宫颈癌发生和发展的主要因素，近年来人们较多的应用HPVDNA检测方法对宫颈病变进行检测，HPVDNA联合细胞学检测越来越多的应用到临床上宫颈病变的筛查工作中，该方法的应用可以有效地降低宫颈癌的发生率，但是HPVDNA检测是-•种病因检测，对致癌基因的转录情况及活动情况却无法预测。有研究指出高危HPVE6/E7mRNA检测能对病毒的活动程度及病变程度进行预测［2】。为了探究其检测效果，本研宄拟对高危HPVE6/E7mRNA的临床

5、诊断价值进行研究，现将研究结果报道如下。1.对象与方法1.1研究对象选取2015年1月〜2015年12月间在汕头大学医学院第一附属医院妇产科就诊的148例患者（多以接触性出血、白带异常、下腹隐痛、阴道异常排液等就诊）作为研究对象，均行宫颈脱落细胞的液基细胞学检査（TCT）HPVDNA分型检测和高危HPVmRNA检测，对苏中任意-•样阳性者行阴道镜下宫颈活组织检查，并送病理科行组织病理学检查，以病理报告为金标准。根据病理诊断结果分为两组，低级别宫颈病变患者（慢性宫颈炎、CINI级患者）共70例为对

6、照组，高级别宫颈病变患者（包括CINII级、CINIII级及宫颈浸润癌）共78例为试验组。患者年龄在20〜65岁之间，平均年龄为30.5±2.1岁，两组患者在年龄、病程、病史等方面差异均无统计学意义（P〉0.05）,具有可比性。1.2实验方法TCT检测使用液基细胞学专用取材刷完全插入宫颈口，冋一方向旋转3〜5周，收集宫颈口及宫颈管的脱落上皮细胞，并将采集的细胞涮洗在含有细胞保存液的小瓶内，经过制片、固定、染色后由专业病理科医师判读。诊断标准采用国际癌症协会推荐的2001年TBS（T

7、heBethesdaSystem）分级系统。HPVDNA分型检测采用凯普HPV专用宫颈刷，紧贴宫颈口稍用力顺吋针旋转5周，放人专用的含有细胞保存液的试管瓶中。使用凯普医用核酸分子杂交仪及其配套试剂对21种常见的基因型进行分型检测，包括14种高危型HPV（16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68）,5种低危型HPV（6、11、42、43、44）和两种中国人常见的亚型HPV（53、CP8304）。步骤包括样本HPV的DNA提取、PCR扩增、核酸分子快速导流杂

8、交、结果判读。高危HPVE6/E7mRNA检测采用TCT剩余标本，试剂盒和仪器均购自河南科蒂亚生物技术冇限公司，针对14种高危HPV(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66和68)检测。主要步骤包括裂解细胞、杂交捕获mRNA、信号放大、底物发光反应，经冷光仪检测为光子数，经Diacarta公司计算机软件计算转换后自动判断结果,最终获得拷W数，拷W数〉0为阳性。通过阴道镜下点宫颈组织活检，制成石蜡切片，由专业病理科医师阅片。组织病理诊断分为慢性宫颈炎、CINI