一种改良的植物基因组dna通用提取方法

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1、植物分类与资源学报2014，36(3):375～380PlantDiversityandＲesourcesDOI:10．7677/ynzwyj201413156*一种改良的植物基因组DNA通用提取方法1＊＊2＊＊21＊＊＊陈林杨，宋敏舒，查红光，李志敏(1云南师范大学生命科学学院，云南昆明650092;2中国科学院昆明植物研究所东亚植物多样性与生物地理学重点实验室，云南昆明650201)摘要:高质量的基因组DNA是分子生物学研究的基础，而从富含糖类和次生代谢物且异质性强的植物材料中分离DNA相对困难。本方法在CTAB法和商业DNA提取试剂盒的基础上，在裂解细胞之前，对植物材料进行预处理，去除干

2、扰DNA提取的代谢物，并在后续步骤中进行了一些优化。该方法适于多种不同的植物种类，所提取的基因组DNA质量较好，能满足下一步基因操作的要求，是一种通用的植物基因组DNA提取方法。关键词:植物基因组DNA;通用DNA提取方法;植物材料中图分类号:Q78，Q943.2文献标识码:A文章编号:2095－0845(2014)03－375－06AModifiedProtocolforPlantGenomeDNAExtraction1＊＊2＊＊21＊＊＊CHENLin-Yang，SONGMin-Shu，ZHAHong-Guang，LIZhi-Min(1SchoolofLifeScience，YunnanN

3、ormalUniversity，Kunming650092，China;2KeyLaboratoryforPlantDiversityandBiogeographyofEastAsia，KunmingInstituteofBotany，ChineseAcademyofSciences，Kunming650201，China)Abstract:ExtractinghighqualitygenomeDNAfromplantisavitalstepinplantmolecularbiologyresearch．Butitisrelativelydifficulttoobtainhighquality

4、DNAfromplantspecieswhicharerichinpolysaccharides，polyphenols，andothersecondarymetabolites．ThismethodwasdevelopedbasesoncommonCTABandcommercialkitmethodwithsomemodificationsandfeaturesremovinginterferingmaterialpriortothecelllysis．HighqualityDNAwasobtainedbythismethodfromavarietyofplantspeciesandeval

5、uatedbyelectrophoresisandspectrometermethods．Wedemonstra-tedthatitisacommonplantgenomicDNAextractionmethodespeciallysuitableforsomedifficultplantspecies．Keywords:PlantgenomeDNA;ModifiedcommonDNAextractionmethod;PlantmaterialDNA提取是分子生物学研究的基础技术。2013)。不同植物的次生代谢物含量和种类差异高质量的DNA是进行后续分子操作，如PCＲ扩较大，同种植物的不同组织

6、和器官的次生代谢物增、分子杂交、限制性酶切、基因克隆、遗传多的含量和种类也不同，要从富含多酚和多糖的植态性分析等研究的必要条件。与动物或微生物材物组织中分离得到高质量的基因组DNA相对困难料相比较，植物的总DNA提取相对困难，其原(Barzegari等，2010;Sahu等，2012;Muhammad等，因是植物有较坚韧的细胞壁，且含有较多的多2013);其次，植物基因组DNA提取的起始材料糖、脂类、多酚等次生代谢物，这些都有可能会经常是干燥的组织甚至是保存多年的标本材料，干扰DNA的提取(Amaini等，2011;李金璐等，相对于新鲜材料，这类材料代谢物浓度更高且有＊基金项目:国家基金委－云

7、南省联合基金重点项目(U1B6601)、国家自然科学基金(30360049)、国家自然科学基金(31170216)、云南省教学名师工程项目＊＊并列第一作者＊＊＊通讯作者:Authorforcorrespondence;E-mail:lizhimin_vip@163.com收稿日期:2013－07－25，2013－12－20接受发表作者简介:陈林杨(1984－)男，硕士研究生，主要从事植物分类、植物