DB22T 2611-2017 梅花鹿冷冻精液

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1、ICS65.020.30B44备案号：54486-2017DB22吉林省地方标准DB22/T2611—2017梅花鹿冷冻精液Sikadeerfrozensemen2017-05-08发布2017-06-08实施吉林省质量技术监督局发布DB22/T2611—2017前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口。本标准起草单位：中国农业科学院特产研究所。本标准主要起草人：杨镒峰、魏海军、许保增、赵伟刚、赵蒙、陈秀敏、鞠妍、曹新燕、薛海龙、刁云飞、李晓霞、王世勇。IDB22/T2611—2017梅花鹿

2、冷冻精液1范围本标准规定了梅花鹿冷冻精液的规格、标识、解冻后精子活力、前进运动精子数、畸形率、菌落数、包装、储存运输。本标准适用于梅花鹿冷冻精液的生产、销售和使用过程中精液的检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本文件。GB/T2828.11计数抽样检验程序第11部分：小总体声称质量水平的评定程序GB/T5458液氮生物容器NY1181输精细管3术语和定义下列术语和定义适用于本文件

3、。3.1冷冻精液frozensemen经处理后在液氮中（-196℃）冷冻保存的精液。3.2冻融精液frozen-thawedsemen冷冻精液在39℃水浴解冻后的精液。3.3前进运动精子数progressivemotility每支细管冻融精液中向前运动的精子数。4质量要求4.1细管4.1.1外观应符合NY1181要求。4.1.2规格0.25ml。1DB22/T2611—20174.1.3容量≥0.18ml。4.2冻融精液4.2.1精子活力≥30%（即0.3）。4.2.2前进运动精子数≥1000万个/管。4.2.3畸形率≤18%。4.2.4细

4、菌菌落数≤100cfu/ml。5抽样根据每头梅花鹿冷冻精液不同的生产批次进行抽样检测，抽样方法应符合GB/T2828.11规定。6试验方法应按附录A的要求执行。7储存冷冻精液应装在包装物内，保存在液氮罐中，定期检查罐中液氮的量，并及时添加液氮以保持包装物完全浸在液氮中，液氮罐应符合GB/T5458的规定。8标识细管标识应符合附录B的规定，包装物标识清晰。9运输冷冻精液在运输过程中应保持液氮罐直立，包装物完全浸在液氮中。2DB22/T2611—2017AA附录A（规范性附录）梅花鹿冷冻精液质量检测方法A.1解冻A.1.1器材细管镊子、恒温水浴

5、锅。A.1.2解冻方法从液氮罐中取出细管冻精，放入到39℃的水浴锅中，完全融化即可。A.2容量A.2.1器材细管剪、细管推针、1.0ml量筒。A.2.2方法解冻方法见A.1.2，用细管剪剪去封口端，用细管推针将精液全部注入到1.0ml量筒内，读数即为每支细管冷冻精液容量。A.2.3计算如所检冻精为1支，则读数即为容量；如检测支数n≥2，按公式（A.1）计算：Q1Q2QnQ.................................(A.1)n式中：Q——细管冻融精液容量，单位为ml；Q1——第一支细管中精液容量，单位为ml；Q2

6、——第二支细管中精液容量，单位为ml；Qn——第n支细管中精液容量，单位为ml；n——检测冷冻精液支数。A.3精液质量检测A.3.1精子活力3DB22/T2611—2017A.3.1.1器材显微镜、精子动力分析系统、载玻片、盖玻片、移液器、枪头、小试管、试管架。A.3.1.2方法解冻方法见A.1.2，用移液器取充分混匀后的解冻精液(或A.2.1检测后的样品）7µl～10µl置于预热好的载玻片上，盖上盖玻片后，立即在显微镜下观察（10×或40×物镜）精子活力，也可使用精子动力分析系统观察活力，分别观察三个视野进行全面评定。A.3.1.3计算三

7、个视野活力观察值的平均值按公式（A.2）计算：n1n2n3M..................................(A.2)3式中：M——精子活力，%；n1——第一视野精子活力，%；n2——第二视野精子活力，%；n3——第三视野精子活力，%。A.3.2前进运动精子数A.3.2.1器材血细胞计数板、血色素管、显微镜或精子动力分析系统、计数器、小试管、试管架、血盖片、移液器、枪头、1.0ml吸管、3%氯化钠溶液。A.3.2.2方法解冻方法见A.1.2，解冻后精液充分混匀后用血色素管或移液器吸取0.02ml(或A.2.1检测后

8、的样品），缓慢注入到盛有0.98ml的3%氯化钠溶液的试管内，充分混匀，配制成稀释50倍的精液。用吸管吸取稀释后精液置于血盖片边缘，使精液自行流入计数室，均匀充满整个计数室，不允