DB22T 2599-2016 梅花鹿精液采集及冷冻技术规程.pdf

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1、ICS65.020.30B44备案号：54272-2017DB22吉本标准仅供内部使用不得翻印林省地方标准DB22/T2599—2016梅花鹿精液采集及冷冻技术规程Technicalspecificationofsemencollectingandfrozeninginsikadeer本标准仅供内部使用不得翻印2016-12-22发布2017-04-01实施吉林省质量技术监督局发布本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2599—2016本标准仅供内部使用不得翻印前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由吉林省畜牧业管理局提出

2、并归口。本标准起草单位：中国农业科学院特产研究所。本标准主要起草人：赵伟刚、魏海军、许保增、杨镒峰、赵蒙、陈秀敏、曹新燕、鞠妍、薛海龙。本标准仅供内部使用不得翻印I本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2599—2016本标准仅供内部使用不得翻印梅花鹿精液采集及冷冻技术规程1范围本标准规定了梅花鹿精液采集前准备、稀释液配制、电刺激采精、精液处理及冷冻保存。本标准适用于梅花鹿精液采集及冷冻生产。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修

3、改单）适用于本文件。GB/T5458液氮生物容器GB6935中国梅花鹿种鹿GB18596畜禽养殖业污染物排放标准NY1181输精细管3术语和定义本标准仅供内部使用不得翻印下列术语和定义适用于本文件。3.1电刺激采精Electricalstimulationejaculations利用电刺激采精仪获得公鹿精液的方法。4采精前准备4.1采精场所采精场应设在距公鹿圈较近处，拨鹿安全方便，应宽敞、安静，地面清洁卫生。4.2采精员准备采精员应剪短指甲，更换好工作服和鞋帽，戴上工作手套。4.3仪器设备预先使冷藏柜平衡在4℃，恒温箱和水浴锅处于37℃工作状态,电刺激采精仪使用前应进行

4、检查，观察指示器是否正确。5稀释液5.1稀释液推荐配方6DB22/T2599—2016表5.1鹿冷冻精液稀释液推荐配方成分含量本标准仅供内部使用不得翻印Tirs2.7g柠檬酸1.53g葡萄糖1.0g甘油6.0ml双蒸水定容至100.0mL5.2稀释液配制方法先用电子天平称取Tirs、柠檬酸和葡萄糖，放入三角烧瓶中，再把三角烧瓶放在电子天平上，归零后直接用三角烧瓶称取甘油，用量桶量取双蒸水，倒入三角烧瓶中，并摇晃使药品充分溶解，放入蒸锅内蒸汽灭菌30min，冷却后取出待用。使用前加入20%卵黄和青霉素、链霉素各10万单位，用磁力搅拌器充分搅拌均匀后放入3℃～5℃的冰箱中待

5、用，放置时间不得超过24h。6采精6.1种公鹿的要求种公鹿应符合GB6935的规定。6.2采精方法本标准仅供内部使用不得翻印采用电刺激采精仪进行梅花鹿精液采集，电刺激采精程序参见附录B。6.3采精频率繁殖期内，成年公鹿每隔一周采精一次。7精液处理7.1精液品质评定精液品质评定见表1。表1精液品质评定参数表项目色泽pH密度活率畸形率8内容乳（灰）白色或淡黄色6.85～6.95≥6×10个/mL≥0.65≤15%7.2精液稀释、分装与平衡7.2.1稀释用37℃预热的稀释液对精液进行两次稀释。先进行半量稀释，10min后再稀释至最终倍数。7.2.2分装2DB22/T2599—

6、2016冷冻精液剂型为0.25ml细管，细管应符合NY1181的要求。精液稀释10min后,用细管灌封仪进行分装、标记和封口。每支细管含有效精子数1000万～1500万。7.2.3平衡本标准仅供内部使用不得翻印分装后的细管精液，用2层～3层干毛巾包裹后放入4℃冷藏柜中平衡3h～4h。8精液冷冻8.1冷冻方法8.1.1程序冷冻仪冷冻按照程序冷冻仪的说明进行操作。如果冻精细管数量不足时，要填充备用塑料细管和细管架以保持最佳冷冻曲线程序自动完成冷冻过程，确保冻精质量。8.1.2广口冷冻罐冷冻将平衡好的细管精液均匀铺于冷冻架上，使冷冻架与液氮面保持2cm～2.5cm的高度，冷冻

7、温度控制在-120℃～-140℃，冷冻时温度回升的最高值不得高于-90℃，5min～8min后将冷冻架浸入液氮中。8.2冻精检查与保存本标准仅供内部使用不得翻印8.2.1冻精检查每批冻精抽样，在38℃温水中解冻后进行活率检查，活率大于0.3者视为合格。8.3冻精保存冻精贮存于的液氮罐中，定期添加液氮，应保证冻精始终浸在液氮中，液氮罐应符合GB/T5458的规定。9采精后的处理废弃物处理应按照GB18596的规定执行，采精后应及时清扫场地并用水冲洗干净。6DB22/T2599—2016AA本标准仅供内部使用不得翻印附录A（规范性附录）梅花鹿