植物体细胞杂交

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4用什么方法可以达到呢？仅仅依靠有性生殖可以达到预期的目的吗？为什么？

5思考：该过程的几个问题（1）去除细胞壁的方法有哪些？（2）融合完成的标志是什么？参与该过程的细胞器有哪些？（3）人工诱导融合的方法有哪些？（4）仅考虑两两融合，融合细胞有几种类型？（5）该植物体细胞杂交过程中的理论基础是什么？（6）得到的杂种植株可育吗？为什么？（7）从中你知道获得多倍体的方法还有哪些？（8）该技术最大的优点（意义）是什么？（一）植物体细胞杂交技术

6（9）虽然得到的植物体没有达到人民预期目的（地上结番茄，地下结马铃薯块茎），但一些科学家却坚信人们的目标终将实现，你能说出其中的理由吗？（一）植物体细胞杂交技术

71．原理植物细胞的，即具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。全能性（二）植物组织培养技术已经分化愈伤组织2．过程：的组织形成幼根和芽→完整植株。

84．植物组织培养条件：离体、无菌、植物激素（生长素、细胞分裂素等）、营养物质、及适宜温度、PH、光照（再分化时）等外界条件3．理论基础：植物细胞的全能性脱分化、再分化的原因：基因选择性表达（二）植物组织培养技术

95．应用（1）植物脱毒（2）快速繁殖（3）细胞培养获得大量代谢产物如紫杉醇、人参皂甙、紫草素（4）人工种子（5）单倍体育种（二）植物组织培养技术

10（三）动物组织、细胞培养技术

111、过程2、理论基础：3、培养条件①无菌、无毒的环境——无菌处理、加抗生素杀菌、定期更换培养液。②营养——葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐和微量元素+血清或血浆等天然成分。③温度和pH——(36.5±0.5)℃和(7.2～7.4)。④气体环境——95%空气+5%CO2。（三）动物组织、细胞培养技术

124.应用(1)生产细胞产品：干扰素、疫苗、单克隆抗体。(2)检测并判断某毒性物质毒性的大小。(3)临床医学研究。（三）动物组织、细胞培养技术

13（四）动物细胞融合技术1、过程2、融合的基础3、人工诱导融合方法4、仅考虑两两融合，融合的细胞有几种类型？

14（五）单克隆抗体制备技术1、过程2、需要筛选几次？目的是什么？3、杂交瘤细胞有什么特点？4、为什么先用抗原刺激小鼠，再提取小鼠B细胞？5、单克隆抗体的优点是：6、单克隆抗体的应用：抗原抗体杂交、生物导弹

15（六）动物细胞核移植技术1、过程2、选择卵母细胞的原因是什么？3、理论基础4、克隆羊的遗传物质来源5、应用：生殖性克隆与治疗性克隆重组干细胞

16预想的克隆人技术路线（六）动物细胞核移植技术

171.人的DNA分子可以和大肠杆菌的DNA分子重组在一起的理论基础是什么？2.人的胰岛素基因可以在大肠杆菌内表达出人的胰岛素，该过程的理论基础是什么？大肠杆菌作为受体细胞的优点有哪些？3.人的干扰素是一种糖蛋白，将人的干扰素基因导入大肠杆菌中表达出大量的基因产物，但却没有活性。你认为其中的原因是什么？4.你认为细胞全能性大小与哪些因素有关？5.请举例说明克隆动物的大致过程，你认为卵（母）细胞质在该过程中的作用是什么？6.通过自己的学习，你认为获得全能性的动物细胞有哪些方法？

18（一）植物组织培养技术（二）植物体细胞杂交技术（三）动物组织、细胞培养技术（四）动物细胞融合技术（六）动物细胞核移植技术（五）单克隆抗体制备技术一、细胞工程概念二、细胞工程技术手段是指应用现代细胞生物学、发育生物学、遗传学和分子生物学的理论与方法,按照人们的需要和设计,在细胞水平上的遗传操作,重组细胞结构和内含物,以改变生物的结构和功能,即通过细胞融合、核质移植、染色体或基因移植以及组织和细胞培养等方法,快速繁殖和培养出人们所需要的新物种的生物工程技术.总结

19练习1.关于动物细胞培养的有关叙述，正确的是()A.细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中B.动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等C.动物细胞培养的目的只是获得大量的细胞分泌蛋白D.动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白酶处理

202.回答下列有关动物细胞培养的问题：（1）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的。此时，瓶壁上形成的细胞层数是。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是。（2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成细胞，该种细胞的黏着性降低,细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量。相互接触接触抑制单层（或一层）胰蛋白酶衰老甚至死亡不死性减少

21（3）现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是。（4）检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到期的细胞用显微镜进行观察。由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色）中

22（5）在细胞培养过程中，通常在条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中的活性降低，细胞的速率降低。（6）给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作进行攻击。冷冻（或超低温、液氮）酶新陈代谢抗原

233.利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（）A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体B.体外培养单个B淋巴细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体C.将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D.利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者

244.下列哪项不属于体细胞核移植技术的应用（）A.加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育B.保护濒危物种C.获得组织器官异体移植的供体D.大量产生紫杉醇

255.下列有关体细胞核移植技术的说法，不正确的是（）A.体细胞核移植技术在多种动物中获得了成功，成功率非常高B.克隆技术的各个环节有待于进一步改进C.大多数克隆动物还存在一些遗传和生理缺陷类的健康问题D.克隆动物食品的安全性问题仍然存在争议

265试管婴儿、试管苗和克隆羊这三者可以说是现代生物科技的杰出成果,下列对其生物学原理及技术的叙述,正确的是()A.都属于无性生殖B.都利用了细胞工程的某些技术C.都不会发生基因重组D.都体现了已分化的细胞具有全能性

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