最新菊花的组织培养(审定)教学讲义ppt课件.ppt

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1、菊花的组织培养(审定)3.1菊花的组织培养【学习目标】（1）说明组织培养的基本原理；（2）学习植物组织培养的基本技术；（3）进行菊花或其他植物的组织培养。【重点和难点】重点：植物组织培养过程中使用的无菌技术;难点：植物组织培养过程中使用的无菌技术一．基础知识3．影响植物组织培养的因素植物组织的种类植物材料的年龄、保存时间营养条件调节剂（植物激素）环境因子（如pH、温度、光照等）内因外因关于材料的年龄和保存时间长短，你来选一选：你选择未开花的菊花植株的茎上部新萌生的侧枝？还是茎下部的老枝？你选择昨天晚上采集的菊花枝条？还是今天早晨采集的？MS培养基所属类别主要成分N、P、K、Ca、Mg、S等

2、B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等甘氨酸、维生素、烟酸、肌醇、蔗糖等大量元素微量元素有机物讨论：1.上述成分各属于哪类营养物质？微量元素、大量元素、蔗糖、甘氨酸和维生素等的主要作用是什么？2.微生物培养基与MS培养基的配方有哪些明显不同？MS培养基所属类别主要成分N、P、K、Ca、Mg、S等B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等甘氨酸、维生素、烟酸、肌醇、蔗糖等大量元素微量元素有机物无机盐碳源、维持细胞渗透压满足细胞代谢受影响后的特殊营养需求2.微生物培养基以______营养为主；MS培养基包含大量______营养；有机无机植物激素使用顺序实验结果先生长素，后细胞分裂素先细

3、胞分裂素，后生长素同时使用讨论：1.生长素和细胞分裂素使用的先后顺序如何影响植物细胞的发育？在组织培养过程中若只需从愈伤组织中提取某种成分，则上述激素使用顺序如何？利于细胞分裂但不分化细胞既分裂也分化分化频率提高生长素/细胞分裂素比值结果比值高时促___分化，抑___形成比值低时促___分化，抑___形成比值适中促进___________生长植物激素讨论：2.同时使用时，生长素和细胞分裂素使用的比例如何影响植物细胞的发育？根芽芽根愈伤组织二．实验操作1.菊花植物组织培养有哪些基本步骤？2.植物组织培养中的无菌操作至关重要，哪些操作过程中哪些环节进行了怎样的无菌操作？（一）制备MS固体培养基

4、（二）外植体消毒（三）接种（四）培养（五）移栽（六）栽培二．实验操作（一）制备MS固体培养基配制_______①配制培养液②调_____③培养基的_____灭菌MS培养基包括20多种营养成分，常用4℃下保存的配制好的培养基________来制备。配制各种母液母液培养基_______PH分装______________法高压蒸汽灭菌（二）外植体消毒生长旺盛的嫩枝茎段→流水冲洗→加洗衣粉刷洗→流水冲洗→无菌吸水纸→___________→无菌水清洗→无菌吸水纸→______________→无菌水冲洗数次70%酒精0.1%氯化汞（三）接种1.无菌操作_____________擦拭工作台；在__

5、______________旁进行；锥形瓶瓶口和用过的器械火焰______灭菌。2.材料的切取和接种消过毒的茎段切成小段（0.5-1cm）→镊子夹取菊花茎段插入锥形瓶中的培养基（应注意方向）70%酒精酒精灯火焰灼烧（四）培养接种后的锥形瓶最好放在_______箱中培养，培养期间应定期________培养温度控制在__________℃每日用日光灯光照____h无菌消毒18-2212（五）移栽打开封口膜清洗转移移栽（移植到珍珠岩等环境）（移到土壤）步骤无菌操作高压蒸汽70%酒精灼烧70%酒精0.1%氯化汞无菌消毒移到消过毒的环境中生长一段时间二．实验操作制备MS培养基外植体消毒接种培养移栽栽

6、培培养基_____________灭菌___________、_______________处理___________擦拭工作台、酒精灯火焰______________箱培养，定期________三．结果与评价正常苗污染苗菊花的组织培养再分化材料性质、营养物质、调节物质、环境条件外植体的消毒接种基本原理:细胞的全能性基本过程:脱分化愈伤组织影响因素：操作流程：配制MS培养基培养移栽栽培1.植物组织培养过程可归纳为：①②③，对此叙述有错误的是（）A．②→③的再分化过程中，细胞增殖的方式为有丝分裂B．植物组织培养依据的原理是细胞的全能性C．③→④过程指植物的营养生长和生殖生长阶段D．将①经脱分

7、化培养成②时，再植上人造种皮可获得人工种子④D巩固练习2.菊花的组织培养需要严格的无菌操作，下列说法正确的是()A．培养基应进行干热灭菌B．刚经过再分化形成根和芽的幼苗可直接移栽到室外土壤C．用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，一旦感染杂菌则前功尽弃D．将菊花茎段插入时应注意方向，不应倒插，是为了防止杂菌污染C三．结果与评价污染途径1、外植体带菌2、培养基及接种器具灭菌不彻底3、接种操作时带入4、环境不清