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时间:2021-04-20
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1、第四微生物的营养(1)三、无机盐大量元素(10-4-10-3moL/L):P、S、K、Mg、Fe、Na等;微量元素(10-8-10-6moL/L):Cu、Zn、Mn、Mo、Co等,须控制量。功能:酶的激活剂(Mg2+,Mn2+,Zn2+,Cu2+),维持大分子和细胞结构(Ca,Mg,Fe等),调节渗透压(Na+)和无氧呼吸氢受体(NO3-,SO42-)等。四、生长因子(酶的辅酶或辅基)1.种类维生素(传统生长因子),嘌呤、卟啉、甾醇、脂肪酸等。2.微生物对生长因子的利用(1)能合成全部:占大多数(自养型),过量合成型(链霉菌→
2、VB12)。(2)不能或只能部分合成(异养型)须额外添加对应因子;如乳酸菌:添加嘌呤→核苷酸;支原体:添加甾醇。六、能量化学物质(化能营养型)有机物:化能异养型无机物:化能自养型辐射能(光能营养型):光能自养和光能异养七、微生物的营养类型按碳源、能源、氢供体划分。划分依据营养类型特点碳源能源氢供体自养型异养型光能营养型化能营养型无机营养型有机营养型CO2为唯一或主要碳源有机物为碳源光为能源有(无)机物为能源无机物为氢供体有机物为氢供体营养类型碳源能源氢供体光能无机自养型光能有机异养型化能无机自养型化能有机异养型CO2有机物(或
3、CO2)CO2有机物光能光能化学能(氧化无机物)化学能(氧化有机物)H2S、水、氢等;藻类、硫细菌有机物,如硫细菌;污水处理氢、H2S、氨等,如硝化细菌、硫化细菌等,物质循环有机物,真菌、原生动物,所有病原菌等注:区分是相对的。异养菌:有机物存在→可同化CO2。自养菌也能利用有机物。条件变化→营养类型改变,如紫色非硫细菌无有机物:自养;有机物存在:为异养;厌氧光照:光能营养;好氧黑暗:化能营养。第二节培养基人工配制,适合不同微生物生长繁殖或积累代谢产物所用的营养基质。一、配制培养基的原则二、培养基的类型及应用一配制培养基的原则
4、目的明确营养协调条件适宜经济节约1.目的明确:目的菌、营养类型、什么用。2.营养协调浓度合适,比例协调(如C/N)。如水>C源>N源>无机盐>生长因子。菌不同,C/N不同,细菌、酵母菌为5/1,霉菌为10/1。同一种菌,生长阶段不同,C/N也不同。如谷氨酸棒杆菌,菌体生长C/N为4/1;谷氨酸积累为3/1。3.条件适宜渗透压,pH,氧化还原电位和水活度。(1)pH细菌:pH7.0-8.0;放线菌:pH7.5~8.5;酵母和霉菌:pH4.5~6.0。调pH方法外源调节:1mol/L的NaOH和HCl溶液内源调节磷酸缓冲剂(KH2
5、PO4和K2HPO4):产生少量酸、碱时(pH6.4-7.2内起调节作用)。碳酸钙:中和培养过程中产生大量酸。培养基中天然缓冲物质:氨基酸,蛋白质。(2)氧化-还原电位()量度还原剂释放电子或氧化剂接受电子趋势。不同微生物要求值不同。好氧:0.3-0.4V→提高通气量或加氧化剂;厌氧:+0.1V以下→加还原剂(抗坏血酸、Na2S等);兼性厌氧:+0.1V→有氧呼吸,-0.1V→发酵。4.经济节约糖蜜(含蔗糖,制糖工业废液)乳清(含乳糖,乳制品工业废液)麸皮、米糠、豆饼粉、花生饼粉等。5.附-灭菌处理121.3℃,15-20
6、min或115℃,35min。不耐高温物质:先过滤除菌或间歇灭菌→混合。长时间高温→磷酸盐、碳酸盐+某些阳离子→沉淀。加EDTA,或分开灭菌→混合。6.常见的四种培养基培养细菌:牛肉膏蛋白胨培养基,pH7.0-7.2培养放线菌:高氏一号培养基,pH7.2-7.4培养酵母菌:麦芽汁培养基,自然培养霉菌:查氏培养基,PDA培养基,pH自然二、培养基的类型及应用(一)按成分来源划分(二)根据物理状态划分(三)按用途划分(一)按成分来源划分1.天然培养基优点:配制方便、营养多、经济。缺点:成分杂,不稳定,重复性差。例:肉汤、麦芽汁培养
7、基。用途:研究和生产。2.合成培养基用途:研究。优点:重复性强。缺点:贵、烦琐、生长慢。例:高氏一号、察氏、葡萄糖铵盐培养基等。3.半合成培养基用途:广泛。例:马铃薯-葡萄糖培养基。(二)根据物理状态划分1.固体培养基(1)固化培养基液体培养基+琼脂(1.5-2%)或明胶(5-12%)。用途:分离、鉴定、活菌计数及保藏。(2)天然固体培养基(3)非可逆性凝固培养基血清凝固或用无机硅胶做凝固剂,不能再融化,培养致病菌。注:凝固剂有琼脂,明胶,硅胶。2.半固体培养基液体培养基+琼脂(0.2-0.7%),如明胶培养基。用途:观察细菌
8、运动、噬菌体效价、厌氧菌的培养和保藏。3.液体培养基4.脱水培养基除水分以外,其他已配制好,如虎红培养基(孟加拉红+氯霉素)。(三)按用途划分1.基础培养基含所需基本营养物质。2.加富培养基基础培养基+特殊营养物质(酵母膏,组织液,血液,血清等)。用途:培养苛刻菌,分离富集菌
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