血液学一般检查实验课学习资料.ppt

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1、血液学一般检查实验课【器材】试管、试管架。2ml吸管、吸耳球。微量吸管、胶吸头、干脱脂棉。玻璃棒。改良Neubauer计数板、盖玻片、绸布。显微镜。MicropipettesMarkers:10ul20ulWarningline【试剂】红细胞稀释液：枸椽酸钠1.0g，36%甲醛液1.0ml，氯化钠0.6g，加蒸馏水至100ml，混匀，过滤两次后备用。【标本】 EDTA-K2抗凝静脉血或末梢血。【操作】1．加稀释液 红细胞稀释液2ml于小试管。2．采血及加血 颠倒混匀样本，用微量吸管吸取全血10μl，擦去管尖外部余血。将吸管插入小试管中红细胞稀释液

2、的底部，轻轻放出血液，并吸取上层红细胞稀释液清洗吸管2～3次。3．充池 充入计数池，放置2～3min。4．计数 将光圈调到最小，光线调暗，用低倍镜找到计数区和格子线，用高倍镜计数中央大方格内4角和正中，共5个中方格内的红细胞数。5．计算红红红红红红细胞数/L=N/5*25*201*10*10E6=(N/100)*1012【参考值】①成年人：男性（4.09～5.74）×1012/L，女性(3.68～5.13)×1012/L。②新生儿：(5.2～6.4)×1012/L。③婴儿：(4.0～4.3)×1012/L。④儿童：(4.0～4.5)×1012/L

3、。五个中方格计数和求均值乘以中方格数量乘以稀释倍数将0.1微升体积内的细胞数换算成升【注意事项】1．器材2．试剂3．标本4．稀释液及稀释倍数5．采血6．充池7．计数白细胞计数【目的】掌握显微镜法白细胞计数（whitebloodcellcount）的方法。【原理】采用白细胞稀释液将血液稀释一定的倍数，同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液注入血细胞计数板，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数，经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。【器材】同红细胞计数,0.5ml吸管【试剂】白细胞稀释液：2％冰乙酸溶液【标本】 EDTA-K2抗凝静脉血或末梢血。【操作】1．

4、加稀释液 吸取白细胞稀释液0.38ml小试管中。2．采血及加血 颠倒混匀样本，用微量吸管吸取全血20μl，擦去管尖外部余血。将吸管插入小试管中白细胞稀释液的底部，轻轻放出血液，并吸取上层白细胞稀释液清洗吸管2～3次。3．混匀 待细胞悬液完全变为棕褐色。4．充池 再次将小试管中的细胞悬液混匀。吸取细胞悬液1滴，注入计数板的计数池中，室温下静置2～3min，待白细胞完全下沉后再做白细胞计数。5．计数 将光圈调到最小，光线调暗，用低倍镜找到计数区和格子线，用低倍镜（或高倍镜）下计数四角4个大方格内的白细胞总数。6．计算白细胞数/L=（N/4）*20*1

5、0*10E6=(N/20)*109【参考值】 ①成人：（4～10）×109/L②儿童：（15～20）×109/L；6个月～2岁：（11～12）×109/L。③新生儿：（15～20）×109/L四个大方格计数和求均值后乘以稀释倍数将0.1微升体积内的细胞数换算成升【注意事项】类似于红细胞计数。应注意白细胞较红细胞少，因此充池更加注重均匀。稀释倍数，因细胞多少而异。试验结束后将用过的标本、盖玻片、微量吸管和纸屑等丢到大垃圾桶将玻璃试管用水冲洗干净倒插入试管架中将牛鲍计数板冲洗干净放入盒中将显微镜按照背后的号码还原至盒中关闭电灯，拔下插线板此课件下载可

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