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时间:2020-09-06
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1、多面体的体积和表面积图形尺寸符号立方体长方体∧棱柱∨三棱柱棱锥棱台圆柱和空心圆柱∧管∨斜线直圆柱直圆锥圆台球球扇形∧球楔∨球缺圆环体∧胎∨球带体桶形椭球体a,b,c-半轴交叉圆柱体梯形体常用图形求面积公式图形尺寸符号面积(F)表面积(S)正方形长方形三角形平行四边形任意四边形正多边形菱形梯形圆形椭圆形a·b-主轴F=(π/4)a·b扇形弓形圆环部分圆环新月形 Ld/102d/103d/104d/105d/106d/107d/10 P0.400.791.181.561.912.252.55抛物线形等多边形基因甲基化检测 甲基化是在DNA甲基转移
2、酶(DNAMethyltransferase,DNMT)催化作用下,利用S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)提供甲基,在CpG二核苷酸中胞嘧啶嘧啶环的五号碳原子上加上甲基的共价修饰过程.DNA甲基化是表观遗传修饰的主要方式,它不改变DNA的一级结构,却在细胞的发育、基因的表达、及基因组的稳定性中起着重要的作用。CpG岛的高甲基化是肿瘤中存在的普遍现象,而启动子CpG岛的高甲基化是除突变和缺失外肿瘤中抑癌基因失活的第三种机制。因此,基因启动子甲基化检测在临床诊断(如甲基化检测与低剂量CT相结合)、药物敏感性检测等
3、方面具有很高的应用价值。目前甲基化特异性PCR(MethylmionSpecificPCR,MSP)及其改进方法是检测基因甲基化的经典方法.MSP法的原理是首先用亚硫酸氢钠修饰处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶都被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则不变。然后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物并进行聚合酶链反应(PCR)扩增,最后通过琼脂糖凝胶电泳分析,确定与引物互补的DNA序列的甲基化状态。MSP法灵敏度较高,应用范围广。一.MSP实验流程:1.基因组抽提;2.基因组DNA定量;3.重亚硫酸盐转化(C转化为U),本步实验至关重要,转化效
4、率高低直接影响实验结果,所以,需要实验者在实验过程中不断摸索合适的实验条件以确保较高的转化效率;4.引物设计(每个基因设计两对引物,分别为:甲基化引物M,非基因化引物U,对应扩增甲基化和非甲基化的目的片段),有时需设计巢式引物;1.PCR扩增:对甲基化和非甲基化的目的片段分别扩增,此时尽可能使用梯度PCR仪,可以同时使用不同的退火温度,以筛选合适的退火温度;2.PCR产物电泳;3.电泳结果分析(定性即有无甲基化,半定量即甲基化程度高低)。 图1:MSPPCR产物电泳图二.qMSP实验流程:
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