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时间:2020-09-25
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1、食品中蛋白质的测定方法食品中蛋白质的测定方法第一法:凯氏定氮法第二法:分光光度法第三法:燃烧法凯氏定氮法测定蛋白质原理食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后以硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质的含量。凯氏定氮法测定蛋白质试剂1硫酸铜。2硫酸钾。3硫酸。4硼酸。5甲基红指示剂。6溴甲酚绿指示剂。7亚甲基蓝指示剂。8氢氧化钠。995%乙醇。10硼酸溶液(20g/L)。11氢氧化钠溶液(400g/L)。12硫酸标准滴定溶液(0.0
2、500mol/L)或盐酸标准滴定溶液。13甲基红乙醇溶液(1g/L)。14亚甲基蓝乙醇溶液(1g/L)。凯氏定氮法测定蛋白质检测流程称取样品(半固体2~3g;固体0.2~2g;液体10~25g)于定氮瓶中硫酸铜0.2g、硫酸钾6g做催化剂20mL浓硫酸(轻摇后于瓶口放一小漏斗)消化至澄清继续0.5-1h冷却,纯水转移至100mL容量瓶中准确移取5ml10mL消化液用于蒸馏,加入10ml水缓慢加入10ml40%的氢氧化钠溶液蒸馏10min(液面离开冷凝管下端,再蒸馏1min)10mL2%的硼酸溶液吸收加5滴甲基红-溴
3、甲酚绿混合指示剂滴定凯氏定氮法测定蛋白质装置1-电炉2-水蒸气发生器(2L烧瓶)3-螺旋夹4-小玻杯及棒状玻塞5-反应室6-反应室外层7-橡皮管及螺旋夹8-冷凝管9-蒸馏液接收瓶。凯氏定氮法测定蛋白质计算方法:X—试样中蛋白质的含量,单位为克每百克(g/100g);V1—试液消耗硫酸或盐酸标准滴定液的体积,单位为毫升(mL);V2—试剂空白消耗硫酸或盐酸标准滴定液的体积,单位为毫升V3—吸取消化液的体积,单位为毫升(mL);c—硫酸或盐酸标准滴定溶液浓度,单位为摩尔每升(mol/L);m——试样的质量,单位为克(g
4、);F——氮换算为蛋白质的系数。谢谢观赏袁博MakePresentationmuchmorefun
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