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时间:2020-10-06
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1、实验教学方案—叶绿体中色素的提取和分离 实验原理 叶绿体中的色素都能够溶解于有机溶剂丙酮中,所以,可以用丙酮提取叶绿体中的色素。 层析液(石油醚)是一种脂溶性很强的有机溶剂。根据叶绿体中的四种色素在石油醚中的溶解度不同来进行分离,溶解度高的在滤纸上扩散的快,溶解度低的扩散得慢。溶解度最高的是胡萝卜素,它随石油醚在滤纸上扩散得最快,叶黄素和叶绿素a的溶解度次之;叶绿素b的溶解度最低,扩散得最慢。这样,四种色素就在扩散过程中分离开来。 目的要求 1.学会提取和分离叶绿体中色素的方法和原理。
2、 2.能分辨叶绿体中的四种色素。 材料用具 新鲜的绿色叶片(如菠菜叶片)。 干燥的定性滤纸,烧杯( 100 mL),研钵,玻璃漏斗,吸管,剪刀,小试管,药勺,量简(10ml),天平,试管架 丙酮,层析液,二氧化硅,碳酸钙。 方法步骤 1.提取绿色叶片中的色素 (1)取几片绿色的叶片,去掉叶柄和主脉,用天平称取5g叶片,剪碎,放入研钵中。 (2)向研钵中放入少许二氧化硅和碳酸钙,进行充分的研磨。用量筒量取5ml丙酮,倒入研钵中,迅速充分研磨。 (3)将
3、研磨液迅速倒入小玻璃漏斗中进行过滤。将滤液收集到一个小试管中,及时用棉塞将试管目塞紧。 2.制备滤纸条 取一块预先干燥处理过的定性滤纸,将滤纸剪成长 10 cm、宽 1cm的滤纸条,在距滤纸条一端 1cm处用铅笔画一条细的横线。 3.画滤液细线、 用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线均匀地画出一条细而直的滤液细线。待滤液于后,再画2~3次。 4.分离叶绿体中的色素 将3 mL层析液倒入烧杯中,将滤纸条(有滤液细线的一端朝下)略微料靠着烧杯的内壁,轻轻地插入到层析液中,随后用培养皿盖盖
4、上烧体;注意,不能让滤纸上的滤液细线触到层析液。 5.观察实验结果 看到四种色素的颜色后,取出滤纸条,观察滤纸条上的色素带颜色、位置、宽窄,并且填写实验报告。 讨论1. 提取和分离叶绿体中色素的关键是什么?2. 为什么不能让滤纸上的滤液细线触到层析液?3.为什么实验结束后一定要用肥皂将手洗净?由于接触了丙酮、苯等化学药品。4. 叶绿体中有哪几种色素?滤纸条上的色素带,从上到下是怎样排列的?5. 叶绿体中的色素含量最多和扩散速度最快的是哪一种?
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