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时间:2020-08-17
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1、蛋白质组学复习重点1.名词解释(掌握名词的中英文)1、蛋白质组(proteome)是指一个基因组、一种细胞或组织表达的所有蛋白质。2、蛋白质组学Proteomic蛋白质组学是通过大规模研究蛋白的表达水平变化、翻译后修饰、蛋白质与蛋白质之间的相互作用,以获取蛋白质水平上疾病变化、细胞进程及蛋白质网络相互作用的整体综合信息的科学研究,是生命科学研究的热点领域之一。3、电喷雾电离(ElectrosprayIonization,ESI)l电喷雾离子化是在质谱系统离子源毛细管的出口处施加一高电压,所产生的高电场使从毛细管流出的液体雾化成细小的带电液滴,
2、随着溶剂蒸发,液滴表面的电荷强度逐渐增大,最后液滴崩解为大量带一个或多个电荷的离子,致使分析物以单电荷或多电荷离子的形式进入气相。4、噬菌体展示技术(phagedisplaytechnology)l一种将外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,使外源基因随外壳蛋白的表达而表达,同时,外源蛋白随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术。5、双向电泳(two-dimensionalelectrophoresis,2-DE)l指的是按照蛋白质的两个性质即“等电点”和“分子量”进行二维电泳分离。过程主要是先进行等电聚焦电
3、泳,按照等电点分离,然后再进行SDS-PAGE,按照分子大小分离,经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。6、等电点(isoelectricpoint)l在某一pH的溶液中,氨基酸或蛋白质解离成阳离子和阴离子的趋势或程度相等,成为兼性离子,呈电中性,此时溶液的pH称为该氨基酸或蛋白质的等电点。7、质谱分析(massspectrometry,MS)lMS是在高真空系统中测定样品的分子离子及碎片离子质量,以确定样品相对分子质量及分子结构的方法。8、生物信息学(bioinformatics)l生物信息学是综合运用数学、计算机科学和生物学的各种工具
4、,来阐明和理解大量数据所包含的生物学意义的新兴交叉学科,包含了生物信息的获取、处理、存储、发布、分析和解释等在内的所有方面。9、酵母双杂交(Yeasttwohybrid)l酵母双杂交系统是将待研究的两种蛋白质的基因分别克隆到酵母表达质粒的转录激活因子(如GAL4等)的DNA结合结构域基因和转录激活因子(如GAL4等)激活结构域基因,构建成融合表达载体,从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统。10、肽指纹图谱(Peptidemassfingerprinting)l理论上每个蛋白消化后有不同的肽段,这些肽段的质量(分子量)就是这个蛋白的肽指纹图谱
5、。用质谱可以检测出其中所有肽段的质量,然后将这些质量与数据库中所有蛋白指纹进行匹配,就可确定一种未知蛋白。11、表面等离子共振(surfaceplasmonresonance,SPR)l表面等离子共振(SPR)是一种物理现象,当入射光以临界角入射到两种不同折射率的介质界面(比如玻璃表面的金或银镀层)时,可引起金属自由电子的共振,由于电子吸收了光能量,从而使反射光在一定角度内大大减弱。其中,使反射光在一定角度内完全消失的入射角称为SPR角。SPR随表面折射率的变化而变化,而折射率的变化又和结合在金属表面的生物分子质量成正比。因此可以通过获取生物
6、反应过程中SPR角的动态变化,得到生物分子之间相互作用的特异性信号。2.简答题1、pleasedescribetheprinciplesofsomekindsofproteinpost-translationalmodification?蛋白翻译后修饰l磷酸化(phosphorylation):指由蛋白质激酶催化的把ATP或GTPγ位的磷酸基转移到底物蛋白质氨基酸残基上的过程,是生物体内一种普遍的调节方式。l糖基化(glycosylation):指在酶的控制下,蛋白质附加上糖类的过程,发生于内质网。在糖基转移酶作用下将糖转移至蛋白质,和蛋白质
7、上的氨基酸残基形成糖苷键。l甲基化(methylation):一般都是指精氨酸或赖氨酸在蛋白质序列中的甲基化。典型的甲基化发生在染色质组蛋白上。l乙酰化(acetylation):指在乙酰基转移酶的作用下,在蛋白质赖氨酸残基上添加乙酰基的过程,是细胞控制基因表达,蛋白质活性或生理过程的一种机制。l泛素化(ubiquitination):泛素(一类低分子量的蛋白质)分子在一系列特殊的酶作用下,将细胞内的蛋白质分类,从中选出靶蛋白分子,并对靶蛋白进行特异性修饰(主要是降解)的过程。2、PleasedescribetheconceptofITRAQ
8、.Isobarictagforrelativeandabsolutequantitation.相对和绝对定量的同位素标记l是定量蛋白质组学常用的高通量筛选技术,利用
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