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时间:2020-08-02
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1、血细胞自动分析仪及其临床应用——血常规分析范圣瑾2010年1月26日血液细胞的发育与分类中性粒细胞:60%为淋巴细胞:40%单核细胞嗜酸性细胞嗜碱性细胞外周血白细胞分类<10%血细胞自动分析仪1947年美国库尔特(W.H.Coulter)发明了用电阻法计数粒子的专利技术。1956年他又将这一技术应用于血细胞计数获得成功其原理是根据血细胞非传导的性质,以电解质溶液中悬浮血细胞在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础,进行血细胞计数和体积测定,这种方法称为电阻法或库尔特原理。仪器在RBC、PLT、WBC计数上依然采用电阻抗法细
2、胞通进小孔的一瞬间,计数电路得到一个相应的大小的脉冲,脉冲的高度是由细胞体积大小决定的血红蛋白仍然采用比色法测定红细胞直方图曲线的峰顶对应的是红细胞的MCV,而曲线基底的宽度基本上反映红细胞的RDW。当红细胞体积大小发生变化时,峰左移或右移,或出现双峰。红细胞直方图正常红细胞直方图,在36~360fl范围内分布两个细胞群体:从50~125fl区域有一个两侧对称、较狭窄的曲线,为正常大小的红细胞从125~200fl区域有另一个低而宽的曲线,为大红细胞、网织红细胞阴影以外的部分在计算RDW时被剔除左侧:血小板凝块、大血小板、电子背景
3、右侧:红细胞二聚体、三聚体或多聚体红细胞RDW的形成与直方图的关系缺铁性贫血曲线峰值左移,提示红细胞体积偏小峰高减低,提示红细胞数量减少曲线底部宽度增加,即RDW增大,提示红细胞大小不等明显轻型珠蛋白生成障碍性贫血曲线峰值左移,提示红细胞体积偏小再Y轴上有一个截距,提示小红细胞较多曲线底部宽度正常,即RDW正常,提示红细胞大小比较均一铁粒幼细胞贫血曲线双峰表明有两类红细胞,一类体积偏小,另一类偏大曲线底部增宽,表明RDW增加。提示红细胞大小不等明显缺铁性贫血图形轻型珠蛋白生成障碍性贫血铁粒幼细胞贫血图形巨幼细胞性贫血曲线峰值右移
4、,提示红细胞体积偏大峰高减低,提示红细胞数量减少曲线底部宽度增加,即RDW增大,提示红细胞大小不等明显(D)、(E)治疗前后巨幼细胞性贫血图形血小板直方图正常血小板直方图,在2~30fl范围内分布,呈左偏态分布,集中分布于2~15fl内。当有大血小板或小红细胞、聚集血小板时,直方图显示异常。(a)标本中含有大量红细胞碎片引起图形变化(b)标本中有多数血小板聚集(c)由于标本中小红细胞增多所致白细胞的三分群各种细胞在稀释液中,经溶血剂的作用,溶解白细胞的膜,仅留下核与颗粒并使细胞缩小,原来最大的单核细胞经溶血及作用后,体积就落在了
5、淋巴和中性之间,这样就按照体积大小,将白细胞分成三群。白细胞直方图左侧峰又高又陡为淋巴细胞峰,最右侧峰又低又宽为中性粒细胞峰,左右两峰间的谷区较平坦为单个核细胞峰中间细胞群可包括大淋巴细胞、原始细胞、幼稚细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞急性淋巴细胞白血病正常曲线变成单一的峰,提示有大量体积一致的细胞,即白血病细胞体积大小接近淋巴细胞,故淋巴细胞白血病的可能性大(a)来自末梢血淋巴细胞增多(其中大颗粒淋巴细胞占42%)(c)为急性淋巴细胞白血病(L2)(幼稚细胞63%)的图形急性淋巴细胞白血病时的白细胞直方图特点急性淋巴细胞白血病
6、时的白细胞直方图特点急性非淋巴细胞白血病正常曲线变成单一的峰,提示有大量体积一致的细胞,即白血病细胞体积大小为中间细胞体积,故非淋巴细胞白血病的可能性大(b)为急性非淋巴细胞性白血病(M2)(其中幼稚细胞占72%)的图形急性非淋巴细胞白血病时的白细胞直方图特点慢性粒细胞白血病正常曲线变成单一的峰,但跨度很大,提示有大量体积不一致的细胞,因为慢粒含有各种类型的幼稚细胞,故慢性粒细胞白血病的可能性大慢性淋巴细胞白血病时的白细胞直方图特点异常淋巴细胞增多、单核细胞增多或嗜酸细胞增多症时的白细胞直方图特点白细胞五分类法指通过各种物理和化
7、学技术对白细胞进行分析,以获得外周血液中白细胞的五种常见类型,嗜中性粒细胞,嗜酸性粒细胞,嗜碱性粒细胞,淋巴细胞和单核细胞的百分率和绝对值的测定结果,此外还应该具有对出现异常白细胞的提示或初步分类功能。VCS技术V——体积(Volume)测量法,是采用经典的库尔特专利技术,用低频电流准确分析细胞体积。体积是区分白细胞亚群的一个重要的参数,它可有效区分体积大小差异显著的淋巴细胞和单核细胞。C——高频电导性(Conductivity)细胞膜对高频电流具有传导性,当电流通过细胞时,细胞核的化学组份可使电流的传导性产生变化,其变化量可以
8、反映出细胞内含物的信息。该参数可用来区分体积相近而内部性质不同的细胞群体,如淋巴细胞和嗜碱性粒细胞,S——激光散射(Scatter)测量技术,采用氦氖激光源发出的单色激光扫描每个细胞,收集细胞在10°~70°角度内出现的散射光(MALS)信号。探测细胞内核分叶状
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