人教版教学课件1.1DNA重组技术的工具.ppt

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1、1.1DNA重组技术的基本工具基因工程——分子水平改变生命基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。就是按人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞中，定向地改造生物的遗传性状。基因工程的“专用工具”分子的手术刀——限制性核酸内切酶：(一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子的酶。)来源：从原核生物中分离纯化出来作用：识别由6个核苷酸组成的序列(大多数)识别由458个核苷酸组成的序列(少数)结果：黏性末端和平末端EcoRI的切割切割位点：在中轴线两侧得到：黏性末端GAATTCCTTAAG↓限制酶↓↓限制

2、酶↓CTTAAGAATTCG↓限制酶↓CTTAAGAATTCG↓限制酶↓CTTAAGAATTCGCTTAAGAATTCGCTTAAGAATTCG黏性末端黏性末端SmaI的切割CCCGGGGGGCCC切割位点：在中轴线处得到：平末端CTTAAGAATTCGDNA连接酶2.分子的“缝合针”—DNA连接酶DNA连接酶的作用甲片段CTTCATGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAGGGATT乙片段GGCATCTTAAAATTCCGTAG磷酸二酯键GGCATCTTAAAATTCCGTAGE.coliDNA连接酶只能连接黏性末端T4DNA连接酶连接黏性末端或平末端基因进入受体细胞的载体——“

3、分子的运输车”质粒、噬菌体、病毒运载体1能够在宿主细胞内复制并稳定保存；２具有一个或多个限制酶切位点以便与外源基因相连；３具有标记基因，便于进行筛选．12基因工程的操作工具1.基因的剪刀——限制性核酸内切酶2.基因的针线——ＤＮＡ连接酶3.基因的运输工具——运载体基因工程的操作步骤1.目的基因的提取2.目的基因与运载体结合3.目的基因导入受体细胞4.目的基因的检测与表达小结