3、测定: 3.鸡新城疫(ND)的HA和HI(1)试验准备 ① 抗原:一般以鸡新城疫Ⅱ系或LaUra系冻干苗作为已知抗原,进行试验。 ② 0.7%细胞悬浮液:由鸡翅静脉或心脏采血,放入含有抗凝剂的灭菌试管(按每毫升血加入3.8%灭菌柠檬酸钠0.2毫升做抗凝剂),迅速混匀。如当时不用,可直接采血放入红细胞保存液(保存液2份,血液1份)于4℃冰箱可保存两周。红细胞悬液的配制:将血液注入离心管中,经3000转/分钟,离心5-10分钟,用吸管吸去上清液和红细胞上层的白细胞薄膜,将沉淀的红细胞加稀释液(生理盐水)洗涤。再用离心机30
4、00转/分钟离心5-10分钟,弃上清,再加稀释液洗涤,如此反复洗涤三次,将最后一次离心后的红细胞泥,按0.7%的稀释度加入稀释液(0.7毫升红细胞泥加99.3毫升稀释液)。 ③ 被检血清:将被检鸡群编号登记,用消毒过的干燥注射器采血,注入洁净干燥试管(微量法可用孔径2-3毫米塑料管由翅静脉采血),在室温中静置或离心,待血清析出后使用。每只鸡应更换一个注射器,严禁交叉使用。④ 稀释液:为灭菌的生理盐水。⑤ 红细胞保存液的配制方法:葡萄糖2.05克,柠檬酸钠(SHOO)0.80克,柠檬酸(2H20)0.055克,氯化钠0.