《分子生物实验》课程信息与描述.doc

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1、《分子生物学实验》课程信息与描述课程名称：分子生物学实验学分数：1.5课程属性：专业基础课□专业必修课√专业选修课□课程边界描述：本课程是《微生物代谢工程实验》课程的前置课程。本课程的前置课程：《分子生物学》、《生物化学》、《微生物学》、《微生物学实验》。课程重要知识点描述：序号主题模块描述重要知识点对应的能力培养教学方式1安全教育和分子生物学基本操作实验基本操作、操作规范了解实验守则、实验室安全制度、安全防护、报告书写、考试方式；了解分子生物学实验中常用仪器的种类、构造。课堂讲授玻璃器皿的清洗和试剂配制分子生物学实验中常用的器皿的清洗和常规试剂的配制。操作练习2分子生物学

2、试剂的配置方法，植物组织中提取DNA的方法植物基因组DNA提取方法的介绍、植物基因组DNA提取。操作练习植物基因组DNA的制备及定性定量鉴定植物基因组DNA的定性定量分析方法，紫外分光光度计的使用方法。DNA的定性定量分析操作练习3细菌基因组DNA的制备及定性定量鉴定分子生物学试剂的配置方法，微生物中提取DNA的方法。微生物基因组DNA提取方法的介绍、微生物基因组DNA提取操作练习琼脂糖凝胶电泳分离DNA的原理，基因组DNA的电泳分析技术。DNA的定性定量分析操作练习4基因组DNA的电泳分析电泳基本知识、琼脂糖凝胶电泳检测总DNA的大小琼脂糖凝胶的制备、电泳检测总DNA自主

3、设计操作练习紫外分光光度计检测DNA浓度和纯度的原理和技术利用紫外分光光度计检测DNA的浓度和纯度自主设计操作练习5组织细胞质RNA的制备组织中提取RNA的方法动物组织细胞质RNA提取操作练习总RNA的定性定量分析方法，进一步巩固紫外分光光度计的使用方法RNA的定性定量分析操作练习6细菌RNA的制备细菌细胞中提取RNA的方法细菌细胞RNA提取自主设计操作练习变性琼脂糖凝胶电泳分离RNA的原理，总RNA的电泳分析技术。RNA的定性定量分析操作练习7核酸印迹杂交Southern杂交的方法、Southern杂交技术的原理基因组DNA的酶切，凝聚电泳分离各酶切片段，然后使DNA原位

4、变性Southern杂技的技术应用将DNA片段转移到固相支持物上操作练习DNA自显影技术通过显影检测目的DNA所在的位置。操作练习8PCR反应的基本原理和实验技术引物的设计操作练习PCR扩增DNA中的模板制备、PCR扩增及电泳检测利用PCR技术扩增一段已知的基因片段了解PCR扩增中DNA模板的制备方法。掌握PCR反应的基本原理和实验技术操作练习PCR扩增产物的电泳检测电泳检测PCR产物操作练习9质粒DNA的提取、纯化和电泳鉴定碱变性抽提质粒DNA的基本原理。熟悉碱变性抽提质粒DNA的基本原理和实验中所用各种试剂的成分及其作用课堂讲授抽提质粒DNA中所用各种试剂的成分及其作用

5、质粒抽提的实验操作操作练习10DNA片段的体外连接和感受态细胞的制备和质粒DNA的转化载体与目的基因连接的方法。连接酶的成分及其作用，碱性磷酸酶的作用。熟悉T4DNA连接酶的成分和作用，熟悉碱性磷酸酶的作用。课堂讲授CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞的原理及制备方法载体与目的基因的连接、感受态细胞制备和转化感受态细胞操作练习11DNA的限制性内切酶酶切分析和电泳鉴定讲解限制性内切酶切割DNA的基本原理，酶试剂的重要组分及其作用。要求掌握DNA的酶切技术。熟悉如何根据目的基因合理选择载体与限制性内切酶操作练习12凝胶电泳法进行DNA的分离、提纯和电泳鉴定从琼脂糖凝胶中回收DN

6、A的方法在紫外灯下切割回收目的DNA片段操作练习纯化DNA片段的方法纯化回收的DNA片段并进行检测操作练习13外源基因在大肠杆菌中表达和SDS电泳鉴定外源基因在原核细胞的表达方式；原核表达的基本步骤与方法。阳性重组细菌表达外源DNA操作练习产物鉴定的电泳技术表达产物的鉴定操作练习使用教材：统编教材□英文教材及影印版□文献资料（含标准）□自编教材√