花粉管通道法转化蓖麻的研究.pdf

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1、^CT^nB_REI●CLUI—LTS帅l_l^edE华北农学报·2013，28(5)：124．127花粉管通道法转化蓖麻的研究陈宇杰，黄凤兰，狄建军，苏雅拉图，王云(1．内蒙古民族大学，内蒙古通辽028000；2．内蒙古自治区高校蓖麻产业工程技术研究中心，内蒙古通辽028000)摘要：为验证花粉管通道法进行蓖麻转基因研究的可行性，优化花粉管通道法导入方式及导入时间，为花粉管通道法转基因技术在蓖麻分子育种的应用提供参考依据。采用荧光显微观察对蓖麻品种通蓖5号人工授粉后花粉萌发及花粉管生长情况进行了研究

2、，结果表明，花粉管通道法转化蓖麻的最佳时间为授粉后6～24h。利用花粉管通道技术，将含有GUS基因的植物双元表达载体pPZP221SGN导人蓖麻品种通蓖5号。对85株T植株进行PCR检测，得到10株阳性转化植株，阳性率约为l1．8％。关键词：蓖麻；花粉管通道技术；pPZP221SGN中图分类号：$565．6；Q785文献标识码：A文章编号：1000—7091(2013)05—0124—04StudyonCastorTransformationbyPollen—tubePathwayCHENYu—jie

3、'，HUANGFeng—lan，，DIJian—jun·，SUYa—latu，，WANGYun，(1．InnerMongoliaUniversityfortheNationalities，Tongliao028000，China；2．InnerMongoliaIndustrialEngineeringResearchCenterofUniversitiesforCastor，Tongliao028000，China)Abstract：Thestudyonthepollengerminationandp

4、ollentubegrowthofcastorwasperformedafterartificialpollinationviafluorescencemicroscopyobservationinordertoverifythatthebesttimetoperformgenetictransfor—mationofcastorbypollen—tubepathwaymethodis6—24hafterpollination．PlantexpressionvectorpPZP221SGNcontai

5、nedgeneGUSweretransformedintocastorvarietiestongbi5throughpollen—tubepathway．85strainsofT0gen—erationweretestedbyPCRmethodandthepositivestrainsis10．positiverateis11．8％．Theresultsshowitispos—sibletoperformtransgenicbypollen—tubepathway．Thisprovidessomere

6、ferencesfortheapplicationoftransforma—tiontechnologybypollen—tubepathwayincastormolecularbreeding．Keywords：Castor；Pollentubepathway；pPZP22lSGN花粉管通道法是20世纪80年代由我国学者周于国防、航空、航天、化工医药和机械制造等方面，经光宇⋯先生提出的一种新的转基因技术，发展至济地位和市场价值不可估量。随着生物技术今，该法在植物遗传转化和作物育种工作中发挥了的发展，

7、利用转基因技术改良蓖麻的性状已成为可巨大作用。花粉管通道法的最大优点是不依赖组织行的手段。目前，较普遍的方法是农杆菌介导法进培养人工再生植株，技术简单，不需要装备精良的实行蓖麻的分子育种工作，但此法在蓖麻愈伤组织的验室，常规育种工作者易于掌握。近年来，我国已通诱导、分化和再生等环节中存在着分化率低、重复性过此技术在燕麦、大豆、水稻、小麦等差等问题，制约了蓖麻转基因研究的进一步开展，也一系列作物上育成了许多有生产应用价值的新品系是多年来转基因蓖麻研究一直停滞在实验室未能走或品种，为各类作物育种技术的改进

8、和提高展示了向市场的症结所在。为建立蓖麻简便、易行、成本，阔的前景。低、转化率高、不受基因型依赖的转基因技术，本研蓖麻(RicinuscommunisL．)为大戟科蓖麻属植究首次提出利用花粉管通道法建立蓖麻新的遗传转物，是世界十大油料作物之一，其产物蓖麻油广泛用化体系收稿日期：2013—06—05基金项目：国家自然科学基金项目(31160262；31160290)；内蒙古民族大学科学研究项目(NMDI127)；内蒙古民族大学蓖麻【程研究中心项目(BMYJ