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时间:2020-06-15
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1、RT-PCR常用引物序列RT-PCR引物序列基因来源引物序列产物大小(kb)β-actin人有意义链CCTCGCCTTTGCCGATCC反义链GGATCTTCATGAGGTAGTCAGTC0.62kbβ-actin*大鼠有意义链TACAACCTCCTTGCAGCTCC反义链GGATCTTCATGAGGTAGTCAGTC0.62kbβ-actin小鼠有意义链GTCGTACCACAGGCATTGTGATGG反义链GCAATGCCTGGGTACATGGTGG0.49kbGAPDH人有意义链GGTGAAGGTCGGAGTCAACG反义链CAAAGTTGTCATGGATGHACC0.50kbGAPDH
2、大鼠有意义链GATGCTGGTGCTGAGTATGRCG反义链GTGGTGCAGGATGCATTGCTCTGA0.20kbDynein小鼠有意义链GCGGGCGCTGGAGGAGAA反义链GGATCTTCATGAGGTAGTCAGTC12.3kbPolymeraseε人有意义链CGCCAAATTTCTCCCCTGAAA反义链CCGTAGTGCTGGGCAATGTTC6.8kbPolymeraseε人有意义链AAGGCTGGCGGATTACTGCC反义链GATGCTGCTGGTGATGTACTC3.5kbTuberousSclerosis人有意义链GGAGTTTATCATCACCGCGGAAA
3、TACTGAGAG反义链TATTTCACTGACAGGCAATACCGTCCAAGG5.3kb18SrRNA大豆有意义链CTTTCGATGGTAGGATAGTGGCCT反义链CAATGATCCTTCCGCAGGTTCACCTAC1.5kb*引物不会扩增假基因PCR引物序列基因来源引物序列产物大小(kb)HIVgagregion病毒SK38ATTAATCACTATCCAGTAGGAGAAATSK39TTTGGTCCTGTCTTATGTCCAGAATGC0.11kbβ-globin人(29923)GGTGTTCCCTTGATGTAGCACA(34016)CCAGGATTTTTGATGGGACAC
4、G4.1kbβ-globin人(31194)GCTGCTCTGTGCATCCGAGTGG(34016)CCAGGATTTTTGATGGGACACG2.8kb序列来源:nvitrogen公司大家用什么稀释引物?引物应该用TE稀释。oligo在酸性条件下是不稳定的,容易降解,如果用水溶解引物,无法保证pH值,如果合成引物纯化不好,造成偏酸的话,引物过一定时间就会降解而不能用了。而且,高纯水本身就偏酸,也不利于储存。所以应该按标准操作,溶解引物在1XTE里,这样可以有Buffer保证pH7.5-8,引物才能长久保存。如果要更长期的保存,最好是干粉。
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