一轮复习微生物的培养.ppt

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1、课题1微生物的实验室培养专题2:微生物的培养与应用微生物包括哪五类：病毒细菌放线菌真菌原生动物特点：结构都相当简单,个体多数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用.原核生物界原生生物界真菌界病毒界一、基础知识：(一)微生物芽孢有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适

2、宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌.菌落：单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。菌落是鉴定菌种的重要依据。菌落细菌的菌落特征因种而异细菌的代谢类型根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为两大营养类型。自养菌:分类,举例?异养菌:腐生菌寄生菌大部分病原菌光合自养型:光合细菌化能自养型:硝化细菌,铁细菌,硫细菌真菌（二）培养基1.定义：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。2.营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。

3、此外，还需要满足微生物生长对PH、氧气以特殊营养物质的要求。误认为所有微生物培养基中均需加入“生长因子”点拨碳源、氮源、水分、无机盐、生长因子是微生物生长必需的五大营养成分，但大多数培养基中都含碳源、氮源、水分、无机盐四类物质，可能不需额外添加“生长因子(如维生素)”，这是因为许多微生物可自行合成这些生长因子，而对那些合成能力有限或不能合成生长因子的微生物(如乳酸菌)，则需在培养基中添加诸如维生素等生长因子。3.培养基的类型和用途（1）按物理状态分：固体培养基和液体培养基。其中固体培养基用于菌种保存及分离、鉴定菌落、活

4、菌计数等，液体培养基常用于发酵工业。（2）按成分分：天然培养基和合成培养基。合成培养基:根据细胞生存所需物质的种类和数量，用人工方法模拟合成的。合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。优点：标准化生产，组分和含量相对固定;成本低缺点：缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长需要。天然培养基：天然培养基有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。优点：营养成分丰富，培养效果好缺点：来源受限;成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染;（3）选择培养基与鉴别培养

5、基的比较种类制备方法原理用途举例选择培养基培养基中加入某些化学物质依据某些微生物对某些物质或环境条件的嗜好、抗性而设计从众多微生物中分离所需的微生物，并增加其数目加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌鉴别培养基培养基中加入某种指示剂或化学药品依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中的特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计鉴别不同种类的微生物伊红－美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌选择培养基制备方法或实例选择培养基的具体实例：1.加入青霉素的培养基：分离酵母菌、霉菌等真菌2.加入高浓度食盐的培养基：分离金黄色葡萄球菌3.只有尿素

6、作为惟一氮源的培养基：分离出分解尿素的细菌4.不加氮源的无氮培养基：分离固氮菌5.只有纤维素作为惟一碳源的培养基：分离分解纤维素的细菌6.不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物（１）消毒定义：指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物。（不包括芽孢和孢子）消毒与灭菌的概念及两者的区别（2）灭菌的定义：使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，而达到完全无菌之过程。灭菌消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。条件结果常用方法应用范围消毒较为温和的物理或化

7、学方法仅杀死物体表面或内部的部分微生物煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高温的液体化学药剂消毒法用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌法接种工具干热灭菌法玻璃器皿、金属用具高压蒸汽灭菌法培养基及容器项目优点缺点适用范围平板划线法可以观察菌落特征，对混合菌进行分离不能计数适用于好氧菌稀释涂布平板法可以计数，可以观察菌落特征吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延适用于厌氧菌和兼性厌氧菌不明确每次划线操作中“灼烧接种环”的目的或误认为划线结束后“不必灼烧接种环

8、”平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同①第一次操作：杀死接种环上原有的微生物。②每次划线之前：杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端。③划线结束后：杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（一）筛选菌株原理它的氮源只含有尿素，只有能合