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时间:2020-06-03
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1、品种名称:哥伦比亚琼脂培养基 英文名称:ColumbiaAgarBase 品种编号:024061 规格:250g干粉培养基 培养基用途:用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》2010年版)。 哥伦比亚琼脂培养基使用原理:酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、酵母浸出粉、可溶性淀粉提供碳氮源、维生素和生长因子;羊血是细菌生长繁殖的良好营养物质。在45~50℃的基础培养基中加入血液可以保存血液中某些不耐热的生长因子,同时血球不被破坏。庆大霉素能抑制肠杆菌科和铜绿假单胞菌的生长。图鉴: 哥伦比亚琼脂培养基配
2、方(每升): 酪蛋白胰酶消化物10.0g 心胰酶消化物3.0g 玉米淀粉1.0g 肉胃酶消化物5.0g 酵母浸出粉5.0g 氯化钠5.0g 琼脂15.0g 最终pH7.3±0.2 哥伦比亚琼脂培养基使用方法: 1、称取本品44.0g,加入蒸馏水或去离子水1L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,在45~50℃,每100.0毫升培养基加入5.0~10.0ml无菌脱纤维羊血,可配成血琼脂;如检测梭菌,每100ml培养基基础加入配套试剂1支(SR0160)(33.3mg/L硫酸庆大霉素),均匀,倾注平板。 2、接种菌株至平板上
3、划线,35~37℃厌氧培养18~24小时;(药品)取培养物0.2ml涂抹于平板30~35℃厌氧培养48~72h。结果观察。 培养基质量控制: 下列质控菌株接种至本培养中于35~37℃培养24h结果如下:(添加血) 菌名 菌号 生长状况 培养特征 单核细胞增生李斯特氏菌CMCC(B)54002 良好 窄小β溶血环 金黄色葡萄球菌 ATCC6538 良好 β溶血环 乙型溶血性链球菌 CMCC(B)32210 良好 β溶血环 肺炎链球菌 CMCC(B)31001 良好 α溶血环 下列
4、质控菌株接种至本培养中于30~35℃培养48~72h结果如下:(添加庆大霉素) 菌名 菌号 生长状况 培养特征 产气荚膜梭菌 ATCC13124 良好 灰白色 铜绿假单胞菌 CMCC(B)10104 抑制 -- 大肠埃希氏菌 CMCC(B)44102 抑制 -- 贮存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
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