平板计数琼脂培养基

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1、PCA平板计数琼脂培养基平板计数琼脂培养基即PCA,是在08GB中用于菌落总数测定的配方:1、成分  胰蛋白胨    5.0g  酵母浸粉    2.5g  葡萄糖    1.0g  琼脂      15.0g  蒸馏水    1000mlpH7.0士0.22、制法:  将上述成分加于蒸馏水中,煮沸溶解,调节pH。分装试管或锥形瓶,121℃高压灭菌15min。    LST月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤简称LST,在08GB中是用于大肠菌群的检测,大肠杆菌的计数,金黄色葡萄球菌的检测。配方:1、成分:  胰蛋白胨

2、或胰酪胨  20.0g  氯化钠        5.0g  乳糖          5.0g  磷酸氢二钾      2.75g  磷酸二氢钾      2.75g  月桂基磺酸钠    0.1g  蒸馏水        1000mlpH6.8士0.22、制法:  将上述成分溶解于蒸馏水中,调节pH,分装到有玻璃小导管的试管中,每管10ml。121℃高压灭菌15min。  煌绿乳糖胆盐肉汤BGLB煌绿乳糖胆盐肉汤简称BGLB,在08国标中是用于大肠菌群的检测配方:1、成分:  蛋白胨      10.0g  乳糖        1

3、0.0g  牛胆粉溶液    200.0ml  0.1%煌绿水溶液  13.3ml  蒸馏水      1000mlpH7.2士0.12、制法:  将蛋白胨、乳糖溶解于500ml蒸馏水中,加入牛胆粉溶液200.0ml(将20.0g脱水牛胆粉溶于200ml的蒸馏水中,pH7.0-7.5)用蒸馏水稀释到975ml,调节pH至7.4,再加入0.1%煌绿水溶液13.3ml,用蒸馏水补足到1000ml,用棉花过滤后,分装到有玻璃小导管的试管中,每管10ml。121℃高压灭菌15min。  V-P试剂  Voges-Proskauer试剂V-

4、P试剂是Voges-Proskauer试剂的简称,用于副溶血性弧菌的V-P试验。配方:1、成分  甲液    α-萘酚  5.0g    无水乙醇100.0ml  乙液    氢氧化钾  40.0g    用蒸馏水加至1000ml2、试验方法  将3%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂生长物接种3%氯化钠MR-VP培养基,36℃士1℃培养48h。取1ml培养物转放到一个试管内,加0.6ml甲液,摇动。加0.2ml乙液,摇动。随意加一点肌酸结晶,4h后观察结果。阳性结果是呈伊红的粉红色。  尿素培养基尿素培养基是尿素酶琼脂培养基中去掉琼脂的培养

5、基,是用于小肠结肠炎耶尔森氏菌检验。配方:1、成分  尿素      20.0g  酵母浸粉    0.1g  磷酸二氢钾  0.091g  磷酸氢二钠  0.095g  酚红      0.01g  蒸馏水    1000ml2、制法  将上述成分于蒸馏水中溶解,校正pH6.8士0.2.不需要加热,过滤除菌,无菌分装于灭菌小试管中,每管为3ml。3、试验方法  挑取琼脂培养基接种于尿素培养基,26士1℃培养24h。尿素酶阳性者由于产碱而使培养基变成红色。改良CCD琼脂  mCCDmCCD是改良CCD琼脂的简写,在08GB中是用于

6、空肠弯曲菌检验的。配方:1、    基础培养基:成分:    肉浸液      10.0g    动物组织酶解物10.0g    氯化钠      5.0g    木炭        4.0g    酪蛋白酶解物  3.0g    去氧胆酸钠    1.0g    硫酸亚铁    0.25g    丙酮酸钠    0.25g    琼脂        8.0g-18.0g    水        1000ml制法:用水溶解基础培养基成分,煮沸。分装至合适的三角瓶内,121℃高压灭菌15min。2、    抗生素溶液成分头孢哌酮  

7、      0.032g两性霉素        0.01g利福平        0.01g乙醇/灭菌水(50/50,体积比)5ml制法:将上述成分溶解于乙醇/灭菌水混合溶液中。3、    完全培养基:成分:    基础培养基      1000ml    抗生素溶液      5ml制法:当基础培养基的温度约为45℃左右时,加入抗生素溶液,混匀。待完全培养基的pH值调至7.2士0.2(25℃)。倾注约15ml于无菌平皿中,静置至培养基凝固。使用前需预先干燥平板。可将平皿盖打开,使培养基面朝下,置于干燥箱中约30min,直到琼脂表面

8、干燥。预先准备的平板未干燥时在室温放置不得超过4h,或在4℃左右冷藏不得超过7.4.Bulton肉汤在08国标中,Bulton肉汤是用于空肠弯曲菌检验的。配方:1、    基础培养基成分:动物组织酶解物    10.0g乳白蛋白水解物    5.0

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